Ultra-Long Master Mix (2×) 凭借其卓越的性能和便捷的操作流程,成为扩增选择全能核酸酶(Benzonase Nuclease)是一种来源于粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)的基因工程核酸内切酶,能够高效降解所有形式的DNA和RNA,包括单链、双链、线状、环状和超螺旋结构。其纯度≥99%,并带有His-tag,便于纯化和检测。 特性与优势 广谱降解能力:全能核酸酶能够将DNA和RNA降解为2-5个碱基长度的5'-单磷酸寡核苷酸,且不具有碱基识别特异性。 高稳定性:在广泛的条件下(如6M尿素、0.1M盐酸胍、0.4% Triton X100、0.1% SDS、1 mM EDTA、1 mM PMSF等)仍保持高效活性。 无蛋白酶活性:不具有蛋白水解活性,不会对蛋白质样品造成损伤。 His-tag:带有His-tag的全能核酸酶便于通过金属螯合层析进行纯化和检测。 应用场景 去除核酸污染:在生物制药中,全能核酸酶可用于去除疫苗、蛋白或多糖类生物制品中的核酸残留,使核酸含量符合FDA和国内的要求。 降低样品粘度:在细胞裂解后,全能核酸酶能够降解核酸,减少溶液粘度,便于后续操作。 细胞培养产物纯化:降解核酸,避免核酸对细胞产物的影响,提高纯化效率。 它具有与 EB 相当的灵敏度,能够检测到低浓度的核酸分子,同时避免了 EB 的高毒性和潜在致癌性。T4 Gene 32 Protein(gp32)是一种单链DNA(ssDNA)结合蛋白,来源于T4噬菌体,广泛应用于分子生物学实验中。它在T4噬菌体的DNA复制、重组和修复过程中发挥关键作用。功能与特性稳定ssDNA:gp32能够特异性结合ssDNA,防止其重新退火或被核酸酶降解,从而保护ssDNA的完整性。促进DNA代谢:通过与ssDNA结合,gp32为多种DNA代谢相关蛋白(如DNA聚合酶、限制性内切酶等)提供结合位点,促进其功能。结构域功能:gp32由三个结构域组成,其中C端结构域在调节ssDNA结合和与其他蛋白的相互作用中起关键作用。应用场景电子显微镜观察:用于稳定和标记ssDNA区域,便于通过电子显微镜观察细胞内DNA的结构。提高RT-PCR效率:在RT-PCR中,gp32能够增加反转录酶的产量和过程性,从而提高反应效率。增强PCR产物产量:在PCR反应中,gp32能够提高产物的产量和特异性,特别是在处理复杂样本(如土壤样本)时,可有效降低抑制物的影响。重组酶聚合酶扩增(RPA):在RPA反应中,gp32能够显著提高扩增效率,适用于快速、等温的核酸检测。 因此,该缓冲液不仅适用于常规的DNA电泳,还特别适合用于终止酶促反应后的样品分析。T4 Gene 32 Protein(T4 gp32)是一种由T4噬菌体基因32编码的单链DNA(ssDNA)结合蛋白,广泛应用于分子生物学实验中。该蛋白在T4噬菌体的DNA复制和修复过程中起关键作用,能够协调性地结合并稳定瞬时形成的ssDNA区域。 功能与特性稳定ssDNA:T4 gp32能够高效结合ssDNA,防止其降解或重新退火,尤其在DNA复制和修复过程中发挥重要作用。促进酶活性:该蛋白可显著提高限制性内切酶的消化效率、RT-PCR中反转录的效率,以及T4 DNA聚合酶的活性。增强PCR效率:在PCR反应中,T4 gp32能够提高产物的产量和特异性,特别是在处理复杂样本(如土壤样本)时,可有效降低抑制物的影响。应用场景电子显微镜观察:用于稳定和标记ssDNA区域,便于通过电子显微镜观察细胞内DNA的结构。重组酶聚合酶扩增(RPA):在RPA反应中,T4 gp32能够显著提高扩增效率,适用于快速、等温的核酸检测。RT-PCR和qPCR:通过结合ssDNA,T4 gp32能够提高反转录效率,增强反应的灵敏度。 操作简单:无需脱色或冲洗,可直接使用紫外凝胶透射仪观察。2×TBE-Urea 上样缓冲液是一种专门用于变性核酸电泳的试剂,能够有效解除核酸的二级结构,使其保持单链构型,从而实现更清晰的电泳分离效果。组成成分 该缓冲液的主要成分包括:尿素(Urea):用于解除核酸的二级结构,保持核酸的单链状态。溴酚蓝(Bromophenol Blue) 和 二甲苯青(Xylene Cyanol FF):作为示踪染料,用于观察电泳的进程。Tris、硼酸和 EDTA:维持电泳过程中的缓冲体系,确保电泳条件的稳定。聚蔗糖(Ficoll):增加样品密度,帮助样品沉入凝胶孔中。 使用方法样品处理:将 2×TBE-Urea 上样缓冲液与待测核酸样品按 1:1 比例混合,70℃加热 3-5 分钟,使核酸充分变性,之后立即置于冰上冷却。上样与电泳:将处理后的样品加入变性聚丙烯酰胺凝胶的加样孔中,进行电泳。应用场景2×TBE-Urea 上样缓冲液主要用于单链 DNA(ssDNA)和 RNA 的变性凝胶电泳,广泛应用于基因分型检测(如 SSR 标记、AFLP、RFLP 等)。它不适用于非变性凝胶电泳或蛋白电泳。 0×DNA Loading Buffer的储存条件较为灵活,可在4°C或室温下保存。分子生物学实验中,RNA凝胶电泳是一种常用的检测手段,用于分析RNA的完整性、纯度和分子量。而5×RNA Loading Buffer则是RNA电泳中不可或缺的重要试剂。 5×RNA Loading Buffer是一种5倍浓缩的上样缓冲液,专为RNA非变性凝胶电泳设计。其主要成分包括甘油、EDTA、溴酚蓝和二甲苯青FF。甘油的作用是增加样品的密度,使RNA样品能够顺利沉入凝胶加样孔中,避免漂浮。EDTA则用于螯合金属离子,防止RNA降解。溴酚蓝和二甲苯青FF作为示踪染料,能够在电泳过程中指示RNA的迁移位置。 使用时,通常将RNA样品与5×RNA Loading Buffer按4:1的体积比混合,例如4μL的RNA样品加入1μL的上样缓冲液,混匀后即可上样。这种缓冲液经过DEPC处理,确保无RNase污染,从而保护RNA样品的完整性。 5×RNA Loading Buffer适用于多种RNA电泳实验,包括非变性琼脂糖凝胶电泳和变性琼脂糖凝胶电泳。它不仅操作简便,还能有效防止RNA降解,确保电泳结果的可靠性。 在特定的缓冲液条件下,核酸会吸附到磁珠表面,而杂质(如蛋白质、引物、dNTP等)则被洗去。在分子生物学和生物医学研究中,荧光定量PCR(qPCR)是基因表达分析和病原体检测的核心技术之一。One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus)通过整合尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)技术,为研究人员提供了一个高效、防污染且便捷的一步法qPCR解决方案,特别适用于需要快速、准确检测RNA样本的实验场景。 一步法RT-qPCR的优势 传统的RT-qPCR实验通常需要先进行逆转录反应,将RNA转录为cDNA,然后再进行qPCR扩增。这种方法虽然能够获得准确的结果,但操作步骤繁琐,容易引入误差。而One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus)采用了一步法设计,将逆转录和qPCR扩增整合到同一个反应体系中,大大简化了操作流程,减少了人为误差,提高了实验的重复性和可靠性。 UDG技术的防污染机制 UDG技术是该试剂盒的核心亮点之一。UDG能够特异性识别并降解含有尿嘧啶(U)的DNA,从而防止实验室中残留的PCR产物污染。在qPCR反应开始前,UDG会降解引物或模板中的尿嘧啶,防止非特异性扩增。 上海保藏生物技术中心是一家有着先进的发展理念,先进的管理经验,在发展过程中不断完善自己,要求自己,不断创新,时刻准备着迎接更多挑战的活力公司,在上海市等地区的化工中汇聚了大量的人脉以及客户资源,在业界也收获了很多良好的评价,这些都源自于自身的努力和大家共同进步的结果,这些评价对我们而言是**好的前进动力,也促使我们在以后的道路上保持奋发图强、一往无前的进取创新精神,努力把公司发展战略推向一个新高度,在全体员工共同努力之下,全力拼搏将共同上海保藏生物技供应和您一起携手走向更好的未来,创造更有价值的产品,我们将以更好的状态,更认真的态度,更饱满的精力去创造,去拼搏,去努力,让我们一起更好更快的成长! |