SYBR Green I是qPCR中常用的荧光染料,能够实时监测DNA扩增过程,广泛用于基因表达分析T4 RNA连接酶1(T4 RNA Ligase 1)是一种ATP依赖的酶,能够催化单链RNA、单链DNA或单核苷酸分子间或分子内5'-P末端与3'-OH末端之间形成磷酸二酯键。这种酶在RNA分子间的连接效率最高,其次为DNA与RNA之间的连接,而DNA分子间的连接效率最低。 工作原理 T4 RNA连接酶1的催化过程包括三个步骤: 酶与ATP反应,生成酶-AMP中间产物并释放焦磷酸。 AMP从中间产物转移到核酸的5'磷酸末端,形成腺苷酰化核酸中间产物。 另一核酸的3'羟基进攻腺苷酰化核酸中间产物的5'磷酸末端,形成3'-5'磷酸二酯键并释放AMP。 产品特点 高纯度与稳定性:蛋白纯度超过99%,酶活性高,稳定性好。 无核酸酶污染:经过DEPC处理,确保无RNase、DNase和蛋白酶污染。 适用范围广:可用于RNA和RNA之间的连接、RNA和单核苷酸之间的连接(用于3'末端标记)、RNA和DNA之间的连接,以及DNA的环化连接。 应用场景 miRNA检测:通过将miRNA首尾相连形成circRNA,结合RT-qPCR技术,提高检测灵敏度。 RcView 吖啶橙核酸染料的使用方法与溴化乙锭(EB)相同,操作简便。在分子生物学和生物医学研究中,荧光定量PCR(qPCR)是一种广泛使用的高灵敏度和高特异性的基因表达分析技术。SYBR Green qPCR Mix (2×)作为一种专为qPCR设计的预混液,凭借其高效、便捷和高灵敏度的特点,成为了许多实验室的首选试剂。 SYBR Green qPCR Mix的核心优势 SYBR Green qPCR Mix (2×)是一种预配制的高浓度反应体系,专为qPCR实验设计。它含有优化的反应缓冲液、dNTPs、Mg²⁺、SYBR Green荧光染料以及热启动Taq DNA聚合酶。SYBR Green是一种能够特异性结合双链DNA的小分子荧光染料,在qPCR过程中,随着DNA扩增产物的增加,SYBR Green发出的荧光信号也随之增强。通过实时监测荧光信号的变化,可以实现对目标基因的定量分析。 高灵敏度与特异性 SYBR Green qPCR Mix (2×)具有极高的灵敏度,能够检测到低丰度的基因表达。其优化的反应体系确保了高效的DNA扩增,即使在复杂的样本中也能获得准确的定量结果。 胶染法(前染):在制备琼脂糖凝胶时,按 1:10000 的比例加入 4S GelRed 染料ATP(腺苷三磷酸)是一种极为稳定的核苷酸,广泛应用于分子生物学和生物化学实验中。100 mM ATP溶液(无核酸酶)是一种经过严格测试的产品,确保不含DNase、RNase、磷酸酶和蛋白酶,适用于多种实验。 产品特点 高纯度:纯度≥99%,确保实验的可靠性。 无核酸酶污染:使用无核酸酶水配制,确保RNA和DNA的完整性。 稳定保存:在-20℃条件下可稳定保存2年,避免反复冻融。 适用范围广:适用于体外转录、RNA合成与扩增、激酶反应等多种实验。 应用场景 体外转录:用于SP6、T3和T7 RNA聚合酶的反应,生成高质量的RNA。 RNA合成与扩增:提供能量支持,确保反应顺利进行。 激酶反应:作为能量供体,支持激酶活性。 使用注意事项 避免反复冻融:反复冻融会降低ATP的效率。 低温操作:使用时需在冰上操作,并在使用后立即放回-20℃保存。 防止污染:实验过程中需戴一次性手套,避免RNase污染。 而蛋白A则是一种能够与免疫球蛋白G(IgG)特异性结合的蛋白质,广泛应用于抗体纯化等领域。DEPC水(Diethylpyrocarbonate Water)是一种经过特殊处理的超纯水,广泛应用于分子生物学实验中,尤其是在RNA相关研究中。它通过使用DEPC(焦碳酸二乙酯)处理并经过高温高压灭菌,确保水中不含RNase、DNase和proteinase。 原理与制备 DEPC是一种强效的核酸酶抑制剂,能够与RNA酶的活性基团(如组氨酸的咪唑环)结合,使酶失活。DEPC水的制备通常包括以下步骤: 在超纯水中加入0.1%的DEPC,搅拌均匀后静置过夜。 通过高温高压灭菌(121℃,20分钟)分解DEPC,使其失去毒性。 冷却后即可使用,灭菌过程同时确保水中无菌。 应用 DEPC水的主要用途包括: RNA实验:用于RNA沉淀的溶解、反转录、siRNA退火等反应体系,防止RNA被降解。 细胞培养:清洗细胞培养器具,减少RNA酶污染。 基因工程:保护目的基因不被RNA酶降解,提高实验成功率。 其他无酶反应体系:适用于任何需要无RNase、DNase和proteinase的实验。 注意事项 DEPC水虽然经过处理,但仍需小心操作。使用时应戴一次性手套,避免RNase污染。 SYBR Green qPCR Mix通过比较目标基因与参考基因的Ct值,实现基因表达水平的定量分析DNA Marker III是一种即用型的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它由7条线状双链DNA片段组成,片段大小分别为200 bp、500 bp、800 bp、1200 bp、2000 bp、3000 bp和4500 bp。其中,1200 bp条带的浓度最高,便于在电泳后快速定位。产品特性即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接取3-6 µL进行电泳。清晰的电泳条带:条带大小准确,带型清晰,稳定性好。 适用范围:适用于1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶电泳。使用方法上样量:根据加样孔的宽度,取3-6 µL加入琼脂糖凝胶的加样孔中。电泳条件:凝胶浓度:建议使1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶。电泳电压:4-10 V/cm,电泳时间20-30分钟。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。注意事项 琼脂糖质量:建议使用高质量的琼脂糖,以获得更好的电泳效果。电泳缓冲液:使用新鲜配制的电泳缓冲液,避免多次电泳后缓冲液电导增强。保存条件:建议低温保存,以防止核酸酶污染。 Probe qPCR Mix 可用于定量分析基因表达水平,帮助研究人员研究基因在不同生理条件下的变化DL2000 Plus DNA Marker是一种即用型的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它由8条线状双链DNA片段组成,条带大小分别为100 bp、250 bp、500 bp、750 bp、1000 bp、2000 bp、3000 bp和5000 bp。其中,750 bp条带的浓度最高,约为20 ng/μL,其余条带浓度约为10 ng/μL。产品特性 即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接取2-5 μL进行电泳。清晰的电泳条带:条带大小准确,带型清晰锐利,稳定性好。适用范围:适用于1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶电泳,不推荐用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。使用方法上样量:根据加样孔的宽度,取2-5 μL加入琼脂糖凝胶的加样孔中。电泳条件:凝胶浓度:1.0%-2.0%。电泳缓冲液:1×TAE或0.5-1×TBE。电压:5-10 V/cm,电泳时间20-40分钟。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。 上海保藏生物技术中心是一家有着先进的发展理念,先进的管理经验,在发展过程中不断完善自己,要求自己,不断创新,时刻准备着迎接更多挑战的活力公司,在上海市等地区的化工中汇聚了大量的人脉以及客户资源,在业界也收获了很多良好的评价,这些都源自于自身的努力和大家共同进步的结果,这些评价对我们而言是**好的前进动力,也促使我们在以后的道路上保持奋发图强、一往无前的进取创新精神,努力把公司发展战略推向一个新高度,在全体员工共同努力之下,全力拼搏将共同上海保藏生物技供应和您一起携手走向更好的未来,创造更有价值的产品,我们将以更好的状态,更认真的态度,更饱满的精力去创造,去拼搏,去努力,让我们一起更好更快的成长! |