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时间:2025-05-13 07:40来源:网络 字体大小:【

在非洲猪瘟病毒(ASFV)检测中,该产品凭借其高灵敏度和防污染特性,能够快速、准确地检测低浓度病毒

在分子生物学实验中,PCR技术是不可或缺的工具,而Hot-Start Taq DNA Polymerase则是这一技术中的一颗璀璨明珠。它以其独特的机制和卓越的性能,为PCR反应的精准性和特异性提供了强有力的保障。 传统的Taq DNA聚合酶在室温下就具有活性,这意味着在PCR反应开始之前,引物可能会与模板发生非特异性结合,导致背景产物的产生,从而影响实验结果的准确性。而Hot-Start Taq DNA Polymerase通过特殊的化学修饰或物理方法,解决了这一问题。它在室温下处于“关闭”状态,只有在高温下才会被激活,从而有效避免了非特异性扩增的发生。 Hot-Start Taq DNA聚合酶的激活机制通常基于两种方式。一种是通过化学修饰,如在酶的活性位点引入可逆的化学基团,这些基团在高温下被去除,从而恢复酶的活性。另一种是通过物理方法,如将酶与抗体结合,抗体在高温下变性失活,从而释放出具有活性的Taq酶。无论哪种方式,其核心目标都是确保Taq酶在PCR反应的变性阶段才开始发挥作用。

此外,该试剂盒还支持多片段克隆,能够在一次反应中将多个片段同时插入到载体中。

在分子生物学和生物化学研究中,DNA的完整性和准确性对于实验的成功至关重要。Uracil-DNA Glycosylase (UDG),特别是来自大肠杆菌(E. coli)的UDG,是一种能够特异性识别并修复DNA中尿嘧啶(U)的酶。UDG (5U/µl)以其高效的修复能力和精准的特异性,成为了许多实验中不可或缺的工具。 UDG的作用机制 UDG是一种DNA修复酶,能够特异性识别DNA中的尿嘧啶(U),并将其从DNA链中移除。这种酶的作用机制基于其对尿嘧啶的高亲和力。在DNA合成过程中,尿嘧啶可能会由于脱氨反应或其他化学修饰而意外掺入DNA链中。UDG通过识别这些尿嘧啶,并将其从DNA链中切除,从而防止错误碱基的积累。这种修复过程是维持DNA完整性和基因组稳定性的重要机制。 UDG在实验中的应用 PCR反应中的防污染:在PCR实验中,UDG常用于防止引物二聚体的形成和非特异性扩增。通过在PCR反应前加入UDG,可以将引物中的尿嘧啶降解,从而避免引物在反应前的非特异性结合。这种方法被称为“热启动PCR”,能够显著提高PCR反应的特异性和灵敏度。

通过对PAP的功能和调控机制的深入研究,不仅可以帮助我们更好地理解基因表达的分子基础。

白细胞介素 - 25(IL - 25)是一种相对较新发现的细胞因子,在小鼠的免疫系统中发挥着独特的调节作用。它属于IL - 1细胞因子家族,主要由黏膜组织中的上皮细胞和某些免疫细胞产生,参与调节免疫反应和炎症过程。 IL - 25的生物学功能 IL - 25在小鼠免疫系统中具有多种生物学功能。它能够调节免疫细胞的活性,特别是对Th2细胞的分化和功能有显著影响。IL - 25能够促进Th2细胞产生抗炎细胞因子,如IL - 4、IL - 5和IL - 13,从而在过敏反应和寄生虫感染中发挥重要作用。此外,IL - 25还能够调节巨噬细胞和树突状细胞的活性,抑制其促炎反应,减轻炎症损伤。 重组小鼠IL - 25的应用 重组小鼠IL - 25是通过基因工程技术生产的,具有与天然IL - 25相似的生物活性。它在研究中被广泛用于探索IL - 25在免疫反应中的具体作用机制。例如,在体外实验中,重组小鼠IL - 25能够显著促进Th2细胞的分化和抗炎细胞因子的产生,为研究Th2介导的免疫反应提供了有力的工具。 在疾病模型研究中,重组小鼠IL - 25的应用前景也备受关注。

它不仅在细胞生理过程中扮演着重要角色,还在生命科学研究中具有广泛的应用价值。

Cas9 NLS(SpCas9-NLS)是一种经过改造的CRISPR/Cas9系统蛋白,来源于化脓性链球菌(Streptococcus pyogenes)。它通过在Cas9蛋白的N端或C端添加核定位信号(NLS),能够高效地进入细胞核,从而提高基因编辑的效率。 功能与特点 SpCas9-NLS保留了野生型Cas9的高效基因编辑能力,同时通过NLS的引导,能够快速进入细胞核,减少在细胞质中的滞留时间,从而显著提高基因编辑的成功率。此外,SpCas9-NLS在体外切割实验中表现出色,能够快速、特异地切割目标DNA。 应用场景 细胞基因编辑:SpCas9-NLS与sgRNA结合后,可以高效地进入细胞核,实现基因组的定点编辑。 体外切割实验:可用于体外检测sgRNA的切割效率,筛选高效的gRNA序列。 基因敲除与敲入:通过非病毒载体转染,实现基因的敲除或插入。 高保真基因编辑:一些经过优化的SpCas9-NLS突变体(如Cas9 HF-NLS)能够进一步降低脱靶效应,提高编辑的精确性。

对于小于500 bp的DNA片段,检测信号可能较弱,建议使用其他染料如SYBR Green I。

T4 RNA连接酶2截短型(T4 RNA Ligase 2, Truncated)是一种经过基因工程改造的酶,仅包含T4 RNA连接酶2的N端249个氨基酸残基。它能够特异性地将5'端预腺苷化的DNA或RNA连接到RNA的3'羟基末端。与全长的T4 RNA连接酶2不同,截短型酶不需要ATP来发挥活性,但需要预腺苷化的底物。 特点 特异性连接:只能利用5'端预腺苷化的单链DNA或RNA作为3'端接头,大大降低了连接反应的背景。 无需ATP:连接反应不依赖ATP,减少了非特异性连接产物的生成。 高纯度和稳定性:蛋白纯度超过99%,酶活性高,稳定性好。 应用 T4 RNA连接酶2截短型广泛应用于以下领域: 小RNA文库构建:在二代测序(NGS)中,用于miRNA文库构建中RNA的3'端接头连接。 cDNA文库构建:将单链腺苷化引物连接至小RNA上,用于cDNA克隆文库构建。 链特异性cDNA文库构建:将单链腺苷化引物连接至RNA上,用于链特异性cDNA文库构建。

该产品不仅适用于琼脂糖凝胶电泳还可用于非变性丙烯酰胺凝胶电泳,加入PCR产物后不会影响后续的酶切反应

溴化乙锭溶液(EB, 10 mg/ml, RNase free)是一种高度灵敏的荧光染色剂,广泛用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA和RNA分子。它经过RNase-free处理,适用于RNA样本的电泳。产品特性成分:10 mg/ml溴化乙锭和去离子水。保存条件:室温避光保存,有效期为2年。用途:用于核酸电泳前后的染色,以及流式细胞仪的样品染色处理。荧光特性:在302 nm紫外光激发下,放射出橙红色信号。检测灵敏度:可检测到少至10 ng的DNA条带。使用方法电泳前染色(胶染法):将100 ml的琼脂糖凝胶溶液(浓度一般为0.8%-2%)放入微波炉中融化。冷却至60℃左右后加入5-10 µl的溴化乙锭溶液(10 mg/ml),轻轻摇匀后倒胶,避免产生气泡。待胶完全凝固后上样电泳,电泳完毕在紫外灯下观察拍照。电泳后染色(泡染法):琼脂糖凝胶电泳后,将胶浸没在含有EB(0.5 µg/ml)的电泳缓冲液或去离子水中。室温下染色15-45分钟(取决于凝胶厚度)。可选脱色处理:用去离子水或1 mM MgSO4溶液室温浸泡10-30分钟,以降低背景荧光。

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