Taq DNA Polymerase是一种源自嗜热菌的耐热性DNA聚合酶。核酸内切酶VIII(Endonuclease VIII,Endo VIII)是一种具有N-糖基化酶活性和AP-裂解酶活性的DNA损伤修复酶,广泛应用于基因损伤修复研究和相关生物技术领域。 作用原理 核酸内切酶VIII能够识别双链DNA上受损的嘧啶碱基,并在其N-糖基化酶活性作用下切除这些受损碱基,产生一个脱嘌呤(AP)位点。随后,其AP-裂解酶活性会切割AP位点的3'和5'端,产生一个具有3'和5'磷酸的碱基缺口。这种酶能够识别并切除多种受损碱基,包括尿嘧啶、5,6-二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇等。 产品特性 高纯度:核酸内切酶VIII经过重组表达,纯度高,无核酸外切酶、核酸内切酶以及RNase残留。 热失活:75℃加热10分钟可使酶失活。 反应条件:在10 mM Tris-HCl、75 mM NaCl、1 mM EDTA(pH 8.0 @ 25℃)的缓冲液中,37℃孵育。 应用场景 DNA损伤和修复研究:用于模拟和修复DNA损伤。 单细胞凝胶电泳(彗星试验):用于检测DNA损伤。 NGS建库:在高通量测序建库中修复DNA损伤。 酶法合成DNA:释放DNA链。 SYBR Green qPCR Mix (2×) 以其高灵敏度、特异性、操作简便性和广泛的应用范围Tris-硼酸电泳缓冲液(10×TBE)是一种高浓度的缓冲液,广泛应用于核酸电泳实验中,特别适用于DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳。它由Tris、硼酸和EDTA组成,具有强大的缓冲能力,能够维持稳定的pH值,从而提高电泳的分辨率。产品特性成分:主要由900 mM Tris-硼酸和20 mM EDTA组成。工作液浓度:稀释10倍后得到的1×TBE工作液含有90 mM Tris-硼酸和2 mM EDTApH值约为8.0。缓冲能力强:适合较长时间电泳,能够维持稳定的pH值,不易出现pH波动。高分辨率:特别适用于分离小于1 kb的DNA片段,能够提供清晰的条带。保存条件:室温保存,有效期长达12个月。使用方法稀释:将10×TBE缓冲液用蒸馏水或去离子水稀释10倍,制备1×工作液。电泳操作:将稀释后的1×TBE缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加样后开始电泳,电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的核酸染料(如EB或Goldview)染色。在紫外灯下观察核酸条带。 尿素(Urea):用于解除核酸的二级结构,保持核酸的单链状态。λ DNA HindIII + EcoRI是一种常用的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它是通过将λ噬菌体DNA用HindIII和EcoRI两种限制性内切酶完全酶切后获得的,具有明确的片段大小分布。产品特性片段组成:λ DNA HindIII + EcoRI Marker由13条双链DNA条带组成,片段大小范围从125 bp到21,226 bp。即用型设计:已预混1×上样缓冲液,可直接用于凝胶电泳。稳定性:室温保存一个月带型无变化,但建议低温保存以防止核酸酶污染。使用方法电泳条件:凝胶浓度:建议使用0.5%-1.0%的琼脂糖凝胶。电泳缓冲液:1×TAE或0.5-1×TBE。电压:6-8 V/cm,电泳时间30-60分钟。热处理:使用前建议在65℃水浴中加热5分钟,然后在冰浴中冷却3分钟,以避免COS位点的片段结合。上样量:根据加样孔宽度,取2-5 µL加入凝胶加样孔中。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。 通常每次取5 µL加入凝胶加样孔中。如果加样孔较宽,可适当增加上样量。DL2000 DNA Marker是一种广泛应用于琼脂糖凝胶电泳的DNA分子量标准,由特定长度的双链DNA片段组成,可用于估算DNA片段的大小。产品特性DL2000 DNA Marker通常包含6条双链线状DNA条带,分别为100 bp、250 bp、500 bp、750 bp、1000 bp和2000 bp。其中,750 bp条带的浓度通常较高(约100 ng/5 µL),便于观察和作为参考。该Marker已预混有1×Loading Buffer,可直接用于电泳,使用方便。使用方法 电泳条件:建议在1.0% - 2.0%的琼脂糖凝胶中使用,电泳缓冲液可选用1×TAE或0.5 - 1×TBE。电压一般控制在5 - 10 V/cm,电泳时间根据凝胶浓度和电压调整。 上样量:通常每次取5 µL加入凝胶加样孔中。如果加样孔较宽,可适当增加上样量。 染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,然后在紫外灯下观察电泳条带。保存条件短期保存:4℃可保存6个月。长期保存:-20℃可保存1 - 2年。避免反复冻融:反复冻融可能导致条带降解,影响电泳效果。 聚蔗糖(Ficoll):增加样品密度,使样品能够沉入凝胶加样孔中。λ核酸外切酶(Lambda Exonuclease)是一种来源于λ噬菌体的核酸外切酶,能够特异性地作用于双链DNA,沿5′→3′方向逐步去除5′端的单核苷酸。这种酶在分子生物学实验中具有广泛的应用。 工作原理 λ核酸外切酶的最适底物是5′端磷酸化的双链DNA。它能够高效地从5′端逐步降解双链DNA,生成单链DNA或单核苷酸。该酶对单链DNA和非磷酸化的双链DNA底物的降解效率较低,分别只有磷酸化双链DNA的1%和5%。此外,λ核酸外切酶不能从DNA的切刻或缺口处起始消化。 应用场景 单链DNA制备:通过降解双链DNA的一条链,λ核酸外切酶可用于制备单链DNA。例如,在PCR产物中,使用5′端磷酸化的引物,可以通过λ核酸外切酶特异性降解其中一条链,从而获得单链DNA。 DNA末端修饰:在某些克隆实验中,λ核酸外切酶可用于去除DNA片段的5′端核苷酸,以实现特定的末端修饰。 基因编辑:在基因编辑技术中,λ核酸外切酶可用于处理线性化质粒,以提高同源重组的效率。 DNA损伤研究:λ核酸外切酶可用于研究DNA损伤和修复机制,通过降解损伤的DNA片段来模拟细胞内的DNA修复过程。 它是通过将λ噬菌体DNA用HindIII限制性内切酶完全酶切后获得的,具有明确的片段大小分布。BPTE电泳缓冲液(1×, RNase free)是一种专为RNA电泳设计的缓冲液,广泛应用于分子生物学实验中。它主要由PIPES、TRIS、EDTA等成分组成,经过0.1% DEPC处理,确保无RNase污染。产品特性无RNase污染:经过DEPC处理,确保无RNase污染,适用于RNA电泳。即用型设计:1×浓度,无需稀释,直接使用。稳定性高:室温保存,有效期长达12个月。pH值稳定:最终pH值约为6.5,适合RNA的稳定迁移。使用方法准备凝胶:根据实验需求,制备琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶。加入缓冲液:将BPTE电泳缓冲液(1×, RNase free)加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。 电泳条件:建议使用1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶,电泳电压4-10 V/cm,电泳时间根据RNA片段大小调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的RNA染料(如Goldview或EB)染色,在紫外灯下观察RNA条带。 上海保藏生物技术中心是一家有着先进的发展理念,先进的管理经验,在发展过程中不断完善自己,要求自己,不断创新,时刻准备着迎接更多挑战的活力公司,在上海市等地区的化工中汇聚了大量的人脉以及客户资源,在业界也收获了很多良好的评价,这些都源自于自身的努力和大家共同进步的结果,这些评价对我们而言是**好的前进动力,也促使我们在以后的道路上保持奋发图强、一往无前的进取创新精神,努力把公司发展战略推向一个新高度,在全体员工共同努力之下,全力拼搏将共同上海保藏生物技供应和您一起携手走向更好的未来,创造更有价值的产品,我们将以更好的状态,更认真的态度,更饱满的精力去创造,去拼搏,去努力,让我们一起更好更快的成长! |