在反应体系中加入高浓度PEG 6000（≥20% w/v）可以显著提高其对平末端的连接活性。

Cas9 NLS（SpCas9-NLS）是一种经过改造的CRISPR/Cas9系统蛋白，来源于化脓性链球菌（Streptococcus pyogenes）。它通过在Cas9蛋白的N端或C端添加核定位信号（NLS），能够高效地进入细胞核，从而提高基因编辑的效率。 功能与特点 SpCas9-NLS保留了野生型Cas9的高效基因编辑能力，同时通过NLS的引导，能够快速进入细胞核，减少在细胞质中的滞留时间，从而显著提高基因编辑的成功率。此外，SpCas9-NLS在体外切割实验中表现出色，能够快速、特异地切割目标DNA。 应用场景 细胞基因编辑：SpCas9-NLS与sgRNA结合后，可以高效地进入细胞核，实现基因组的定点编辑。 体外切割实验：可用于体外检测sgRNA的切割效率，筛选高效的gRNA序列。 基因敲除与敲入：通过非病毒载体转染，实现基因的敲除或插入。 高保真基因编辑：一些经过优化的SpCas9-NLS突变体（如Cas9 HF-NLS）能够进一步降低脱靶效应，提高编辑的精确性。

EB与双链DNA结合后荧光强度可增强25倍与双链RNA结合后荧光强度增强21倍这种特性使其能够检测到

DNA Marker VI是一种即用型的DNA分子量标准，广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中，用于估算DNA片段的大小。它由6条线性双链DNA条带组成，条带大小分别为250 bp、1000 bp、2500 bp、5000 bp、7000 bp和10000 bp。其中，2500 bp条带的浓度较高（约100 ng/5 µL），显示为加亮带，便于在电泳后快速定位。产品特性即用型设计：已预混1×Loading Buffer，可直接取2-5 µL进行电泳，使用方便。清晰的电泳条带：条带大小准确，带型清晰，稳定性好。适用范围：适用于1.0%-1.5%的琼脂糖凝胶电泳。使用方法上样量：根据加样孔的宽度，取2-5 µL加入琼脂糖凝胶的加样孔中。每1 mm × 1 mm的加样孔上样1 µL；如果加样孔较宽，可适当增加上样量。电泳条件： 凝胶浓度：建议使用1.0%的琼脂糖凝胶。电泳电压：4-10 V/cm，电泳时间20-30分钟。染色与观察：电泳结束后，使用溴化乙锭（EB）或其他DNA染料染色，在紫外灯下观察条带。保存条件短期保存：4℃可保存6个月。长期保存：-20℃可保存至少2年。

将 4S Green 加入冷却至 50-60℃的琼脂糖溶液中，使其终浓度为 1×，轻轻混合后倒胶。

在现代分子生物学实验室中，Taq PCR Master Mix（2×）是一种极为重要的实验试剂，它为聚合酶链式反应（PCR）的高效进行提供了强大的支持。这种预混液以其便捷性和高效性，成为了众多科研人员和实验工作者的首选。 Taq PCR Master Mix（2×）是一种预先配制好的PCR反应体系，其浓度为常规反应所需浓度的两倍。它包含了Taq DNA聚合酶、dNTPs（脱氧核苷三磷酸）、反应缓冲液以及其他必要的成分，但不包含染料。这种设计使得实验人员在进行PCR反应时，只需将模板DNA、引物和水加入到预混液中，即可快速配制好反应体系，大大简化了实验操作步骤，节省了时间和精力。 Taq PCR Master Mix（2×）的高效性主要体现在以下几个方面。首先，它所含的Taq DNA聚合酶具有出色的耐热性和高效的DNA合成能力，能够在短时间内完成目标DNA片段的扩增。其次，预混液中的反应缓冲液经过优化，能够为Taq酶提供最佳的反应环境，确保反应的高效进行。此外，dNTPs的浓度也经过精确调整，能够满足PCR反应的需求，同时避免因过量而导致的副反应。

建议使用2.0%-2.5%的琼脂糖凝胶，电泳电压4-10 V/cm，电泳时间20-25分钟。

在分子生物学和生物医学研究中，逆转录定量PCR（RT-qPCR）是一种广泛使用的高灵敏度和高特异性的基因表达分析技术。One Step RT-qPCR SYBR Green Kit作为一种一体化的试剂盒，为研究人员提供了一种高效、便捷的一步法RT-qPCR解决方案，特别适用于需要快速、准确检测RNA样本的实验场景。 一步法RT-qPCR的优势 传统的RT-qPCR实验通常需要先进行逆转录反应，将RNA转录为cDNA，然后再进行qPCR扩增。这种方法虽然能够获得准确的结果，但操作步骤繁琐，容易引入误差。而One Step RT-qPCR SYBR Green Kit采用了一步法设计，将逆转录和qPCR扩增整合到同一个反应体系中，大大简化了操作流程，减少了人为误差，提高了实验的重复性和可靠性。 产品特点 高效逆转录酶：该试剂盒含有高效的逆转录酶，能够在短时间内将RNA转录为cDNA，确保逆转录反应的高效进行。 优化的反应体系：试剂盒中的反应体系经过优化，包含SYBR Green荧光染料、热启动Taq DNA聚合酶、dNTPs、Mg²⁺等所有必需成分，确保了qPCR反应的高效扩增。

6×DNA Loading Buffer是一种六倍浓缩的上样缓冲液，主要用于DNA凝胶电泳。

在分子生物学实验中，DNA的完整性和准确性是实验成功的关键。Uracil-DNA Glycosylase（UDG）是一种能够特异性识别并修复DNA中尿嘧啶（U）的酶，广泛应用于PCR反应和其他DNA合成实验中。然而，传统的UDG在反应结束后需要额外的处理步骤来失活酶活性，以防止对后续实验的干扰。热敏感型UDG（Heat-labile UDG）的出现，为这一问题提供了高效的解决方案。特别是来自鳕鱼（Cod）的热敏感型UDG，以其独特的热失活特性和高效性，成为了分子生物学实验中的重要工具。 热敏感型UDG的独特特性 Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Cod) (1U/μl)是一种从鳕鱼中提取并经过工程改造的UDG。与传统的UDG不同，这种酶在高温条件下（通常在95℃）会迅速失活。这一特性使其在PCR反应中具有显著优势。在反应开始前，UDG可以有效去除引物或模板中的尿嘧啶，防止非特异性扩增。而在PCR反应的高温变性步骤中，UDG会自动失活，无需额外的处理步骤，从而简化了实验流程。

其高灵敏度和稳定性使其能够检测低丰度的靶标，即使在样本量有限的情况下也能提供可靠的定量结果。

T7 DNA连接酶是一种来源于T7噬菌体的ATP依赖型双链DNA连接酶，广泛应用于分子克隆和基因工程。它能够高效催化双链DNA中相邻的5'磷酸和3'羟基之间形成磷酸二酯键，特别适合连接黏性末端。 工作原理 T7 DNA连接酶通过ATP提供能量，连接双链DNA的黏性末端。它对黏性末端的连接效率极高，但对平末端的连接能力较弱。在反应体系中加入高浓度PEG 6000（≥20% w/v）可以显著提高其对平末端的连接活性。 特点 高效连接黏性末端：T7 DNA连接酶对黏性末端的连接效率极高，尤其适合需要快速连接黏性末端的应用。 反应条件温和：最佳反应温度为25℃，反应缓冲液中通常包含ATP、MgCl₂和PEG 6000。 不连接平末端：在典型反应条件下，T7 DNA连接酶不会催化平末端的连接，因此在需要区分黏性末端和平末端连接时，T7 DNA连接酶是一个理想的选择。 应用 T7 DNA连接酶广泛应用于以下领域： 分子克隆：用于连接由限制性内切酶切割产生的黏性末端DNA片段。 DNA修复：用于修复双链DNA中的切刻（nick）。

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