3'-羟基攻击5'-磷酸末端，形成新的磷酸二酯键，从而完成DNA片段的连接。

Taq DNA连接酶是一种来源于嗜热菌（Thermus aquaticus）的耐高温DNA连接酶，能够催化与同一互补靶DNA链杂交的两条相邻寡核苷酸链的5'-磷酸和3'-羟基之间形成磷酸二酯键。这种连接反应仅在两条寡核苷酸链与互补靶DNA完全配对且无间隙的条件下才会发生。 工作原理 Taq DNA连接酶以NAD⁺作为辅因子，在37℃至75℃的高温条件下表现出高效的连接活性。它特别适合用于连接具有较长黏性末端的DNA片段，例如12碱基对的突出末端，但对4碱基末端的连接效率较低。 特点 耐高温：在高温（37℃至75℃）条件下具有高活性，适合高温反应。 高特异性：连接反应仅在寡核苷酸链与靶DNA完全配对时发生，可用于检测单碱基替换。 高保真性：经过改造的高保真Taq DNA连接酶（HiFi Taq DNA Ligase）进一步降低了错配连接率，提高了诊断的准确性。 应用 Taq DNA连接酶广泛应用于以下领域： 分子诊断：用于连接酶检测反应（LDR）和多重连接依赖式探针扩增（MLPA），检测基因组中的单核苷酸多态性（SNP）和拷贝数变异（CNV）。

Fast T4 DNA连接酶的反应条件经过优化，能够在短时间内实现高效连接。

在分子生物学领域，DNA聚合酶是PCR技术的核心工具，而Pfu DNA Polymerase因其卓越的高保真性脱颖而出，成为精准基因扩增的首选酶。 Pfu DNA Polymerase是从嗜热菌Pyrococcus furiosus中分离纯化而来的一种耐热DNA聚合酶。与常见的Taq DNA聚合酶相比，Pfu酶最大的优势在于其具有强大的3'到5'外切酶活性，这种活性赋予了Pfu酶校正功能，使其在DNA合成过程中能够及时纠正错误配对的碱基，从而显著提高DNA扩增的准确性。研究表明，Pfu酶的保真度是Taq酶的约7倍，这意味着在扩增长片段DNA或需要高准确性的基因克隆实验中，Pfu酶能够更有效地避免突变的产生。 Pfu DNA Polymerase的耐热性也使其能够适应PCR反应中的高温变性步骤，保证在每个循环中都能稳定地合成DNA。这种耐热性与高保真性相结合，使得Pfu酶在长片段DNA扩增中表现出色。由于其校正功能减少了错误碱基的累积，Pfu酶能够更有效地合成较长的DNA片段，而不会因突变导致扩增失败。

它是一种内切酶，能够特异性地识别DNA-RNA杂交双链中的RNA部分，并在RNA链上切割磷酸二酯键。

在生物医学研究中，白细胞介素-1β（IL-1β）是一种关键的促炎细胞因子，广泛参与免疫反应和炎症过程。猕猴（Rhesus Macaque）作为与人类基因高度相似的非人灵长类动物，是研究人类免疫系统和疾病机制的重要模型。因此，猕猴IL-1β的研究对于理解人类炎症和免疫反应具有重要意义。 IL-1β的生物学功能 IL-1β主要由巨噬细胞、树突状细胞和内皮细胞等产生，是炎症反应的主要启动因子之一。它通过与细胞表面的IL-1受体结合，激活多种信号通路，如NF-κB和MAPK通路，从而诱导多种炎症相关基因的表达。这些基因编码的蛋白能够促进炎症细胞的招募、激活和增殖，增强炎症反应。此外，IL-1β还能刺激其他细胞因子的释放，进一步放大炎症信号。 猕猴模型的重要性 猕猴的免疫系统与人类高度相似，这使得它们成为研究人类免疫反应和疾病机制的理想模型。在猕猴模型中，IL-1β的研究为理解人类炎症和免疫反应提供了重要线索。例如，通过在猕猴中研究IL-1β的作用机制，科学家们可以更好地理解炎症反应的启动和进展，以及如何调节这些反应以治疗炎症性疾病。

干扰素（IFN）是一类具有广泛生物活性的蛋白质，其中IFN-α2b是干扰素α家族的重要成员。

全能核酸酶（Benzonase Nuclease）是一种来源于粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens）的基因工程核酸内切酶，能够高效降解所有形式的DNA和RNA，包括单链、双链、线状、环状和超螺旋结构。其纯度≥99%，并带有His-tag，便于纯化和检测。 特性与优势 广谱降解能力：全能核酸酶能够将DNA和RNA降解为2-5个碱基长度的5'-单磷酸寡核苷酸，且不具有碱基识别特异性。 高稳定性：在广泛的条件下（如6M尿素、0.1M盐酸胍、0.4% Triton X100、0.1% SDS、1 mM EDTA、1 mM PMSF等）仍保持高效活性。 无蛋白酶活性：不具有蛋白水解活性，不会对蛋白质样品造成损伤。 His-tag：带有His-tag的全能核酸酶便于通过金属螯合层析进行纯化和检测。 应用场景 去除核酸污染：在生物制药中，全能核酸酶可用于去除疫苗、蛋白或多糖类生物制品中的核酸残留，使核酸含量符合FDA和国内的要求。 降低样品粘度：在细胞裂解后，全能核酸酶能够降解核酸，减少溶液粘度，便于后续操作。 细胞培养产物纯化：降解核酸，避免核酸对细胞产物的影响，提高纯化效率。

细胞内的腺苷酸水平、其他蛋白质因子以及细胞的生理状态等都会对其产生影响。

在生物实验中，核酸染色是检测DNA和RNA的重要步骤，但传统染料如溴化乙锭（EB）具有致癌性，对实验人员和环境存在潜在危害。4S Green Plus 无毒核酸染料作为一种新型的EB替代品，为科研人员提供了一种安全、高效且环保的选择。 4S Green Plus 是一种无毒、非致癌的核酸染料，其灵敏度与EB相当，能够检测到低浓度的核酸分子。它在295 nm和490 nm处具有荧光激发最大值，与结合DNA的EB荧光激发点相近，可在紫外灯或蓝光LED下清晰观察DNA条带。这种染料不仅安全性高，还具有高特异性和荧光稳定性，不会与其他细胞成分结合，且在实验过程中荧光信号稳定。 4S Green Plus 的使用方法灵活，既可用于凝胶前染色，也可用于凝胶后染色。在凝胶前染色时，将染料加入冷却至50-60℃的琼脂糖溶液中；在凝胶后染色时，每100 mL染色溶液中加入20-30 μL染料，染色30分钟后脱色即可。此外，4S Green Plus 适合用于琼脂糖凝胶中的双链DNA、单链DNA和RNA的检测。

微球菌核酸酶凭借其高效、特异性强的特点，已成为生物技术领域不可或缺的工具酶。

牛痘DNA拓扑异构酶I（Vaccinia DNA Topoisomerase I）是一种来源于牛痘病毒的I型拓扑异构酶，通过基因重组技术制备和纯化。它能够特异性识别双链DNA中的5'-（C/T）CCTT-3'序列，并在该序列的最后一个T和其之后的磷酸二酯键处切割DNA。切割后，酶与DNA的3'末端形成共价复合物，随后可利用DNA的5'羟基重新连接，释放酶并完成修复。 功能与应用 牛痘DNA拓扑异构酶I具有解旋超螺旋DNA的能力，可将超螺旋DNA转化为松弛的双链环状DNA，便于后续的酶切等操作。此外，它还可用于DNA连接，无需ATP或DNA连接酶即可完成。这使得它在TOPO克隆中表现出色，能够在5分钟内高效连接DNA片段，无需传统连接酶。它还被广泛应用于NGS建库中的接头连接。 实验操作 在实验中，牛痘DNA拓扑异构酶I通常在37℃下孵育，反应体系中需包含特定的反应缓冲液。该酶的最佳反应温度为37℃，且可通过80℃加热20分钟使其失活。由于其高效性和特异性，它已成为分子生物学实验中不可或缺的工具酶。

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