其中,2500 bp条带的浓度较高(约100 ng/5 µL),显示为加亮带,便于在电泳后快速定位。在荧光定量PCR(qPCR)实验中,探针法因其高特异性和高灵敏度而被广泛应用于基因表达分析、病原体检测和基因拷贝数变异分析等领域。然而,实验室中的PCR产物污染可能导致假阳性结果,严重影响实验的可靠性。此外,某些qPCR仪器(如部分ABI系列)需要低浓度的ROX参考染料来校正孔间荧光信号的差异。Probe qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus)通过整合低浓度ROX校正功能和UDG防污染技术,提供了一种高效、精准且可靠的qPCR解决方案。 低浓度ROX与UDG技术的双重优势 Probe qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus)结合了两种关键技术:低浓度ROX参考染料和UDG(尿嘧啶-DNA糖基化酶)防污染系统。低浓度ROX能够有效校正孔间荧光信号的差异,确保荧光定量的准确性,特别适用于需要低浓度ROX的qPCR仪器(如部分ABI系列)。而UDG技术则通过降解含有尿嘧啶的DNA,防止实验室中的PCR产物污染,从而减少假阳性结果,提高实验的可靠性。 在琼脂糖凝胶电泳中DL2000DNAMarker可作为分子量标准帮助研究人员快速判断DNA片段的长度在荧光定量PCR(qPCR)实验中,SYBR Green染料因其高灵敏度和广泛的适用性而被广泛使用。然而,某些qPCR仪器(如某些型号的ABI仪器)需要低浓度的ROX参考染料来校正孔间荧光信号的差异。SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX)正是为这些特定需求而设计的优化试剂,它结合了SYBR Green的高效性和低浓度ROX的校正功能,为精准定量提供了有力支持。 低浓度ROX的必要性 在qPCR实验中,ROX参考染料通常用于校正荧光信号的非特异性变化,尤其是在高通量实验中。然而,并非所有qPCR仪器都需要高浓度的ROX。某些仪器(如ABI 7500、7900等)在低浓度ROX存在时能够更好地校正孔间差异,从而提高定量的准确性和重复性。SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX)正是为了满足这些仪器的需求而设计的。 产品特点 优化的反应体系:SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX)含有优化的反应缓冲液、dNTPs、Mg²⁺、热启动Taq DNA聚合酶以及低浓度的ROX参考染料。 Taq DNA Polymerase是一种源自嗜热菌的耐热性DNA聚合酶。Gel-Green是一种新型的荧光核酸染料,旨在替代传统的溴化乙锭(EB),广泛应用于琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的DNA和RNA染色。它具有与EB相同的光谱特性,能够在蓝光透射下呈现绿色荧光。产品特性安全性高:Gel-Green是一种油性大分子,不能穿透细胞膜进入细胞内,诱变性远小于EB。灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。稳定性高:具有良好的热稳定性,可在热的琼脂糖溶液中直接添加。信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。 操作简单:与EB用法完全一样,电泳后染色过程只需30分钟且无需脱色或冲洗。使用方法胶染法(推荐方法):制胶时按1:10000比例加入Gel-Green核酸染料(例如:每50 mL琼脂糖溶液中加入5 μL Gel-Green 10,000×储液)。按照常规方法进行电泳。 泡染法:电泳后,将凝胶放入3×染色液中(用0.1 M NaCl溶液将Gel-Green稀释3300倍)。室温振荡染色30分钟。注意事项Gel-Green对玻璃和非聚丙烯材料有一定亲合力,建议在稀释、贮存、染色等过程中使用聚丙烯 溴酚蓝和二甲苯青FF作为示踪染料,能够在电泳过程中指示RNA的迁移位置。T4 UvsY蛋白是一种来源于T4噬菌体的重组调节蛋白,分子量约为16 kDa。它在T4噬菌体的同源重组过程中发挥关键作用,通过促进T4 UvsX重组酶与单链DNA(ssDNA)的结合,增强同源重组的效率。功能与作用机制重组调节:UvsY蛋白通过与UvsX重组酶形成复合物,促进UvsX与ssDNA的结合,从而加速链置换反应。 单链DNA结合:UvsY蛋白本身具有单链DNA结合活性,能够稳定ssDNA并促进其与UvsX的结合。释放单链结合蛋白:UvsY蛋白能够从ssDNA-单链结合蛋白复合物中释放单链结合蛋白(如T4 gp32),为UvsX重组酶提供结合位点。应用场景 T4 UvsY蛋白是重组酶聚合酶扩增(RPA)技术的核心组分之一,广泛应用于等温核酸扩增。它能够显著提高RPA反应的效率和特异性,适用于快速、灵敏的病原体检测和基因分析。 Probe qPCR Mix 可用于定量分析基因表达水平,帮助研究人员研究基因在不同生理条件下的变化DNA尿素加样缓冲液(2×)是一种专为变性核酸电泳设计的2倍浓缩上样缓冲液,广泛应用于分子生物学实验中。它主要由Tris、EDTA、甘油、尿素等组成,能够有效解除DNA的二级结构,保持DNA的单链构型。产品特性成分:主要由Tris、EDTA、甘油、尿素等组成,不含溴酚蓝。使用特点:加样后易下沉,便于电泳操作。保存条件:-20℃避光保存,有效期为12个月。用途:仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他非科研用途。使用方法稀释:将2×DNA尿素加样缓冲液与待测核酸样品液按照1:1比例稀释。变性处理:将混合后的样品在95°C水浴中处理5分钟,然后在冰上冷却。电泳操作:将处理后的样品直接加入凝胶加样孔中,进行电泳。注意事项分装使用:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。安全操作:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。用途限制:本产品仅供科研使用,不得用于临床诊断或其他非科研用途。DNA尿素加样缓冲液(2×)凭借其高效、稳定和清晰的指示特性,成为变性核酸电泳实验中的理想选择。 它不仅具有与传统溴化乙锭(EB)相当的灵敏度,还具有更高的安全性和特异性。Tris-乙酸电泳缓冲液(50×TAE)是一种广泛应用于核酸电泳的高浓度缓冲液,特别适用于琼脂糖凝胶电泳。它由三羟甲基氨基甲烷(Tris)、乙酸和乙二胺四乙酸(EDTA)组成,能够为核酸电泳提供稳定的pH环境和良好的导电性。产品特性成分:主要由2M Tris-acetate和50 mM EDTA组成。工作液浓度:稀释50倍后的1×TAE工作液含有40 mM Tris-acetate和1 mM EDTA,pH值约为8.0。高效分离:特别适合分离大于13 kb的DNA片段,能够提供更好的分离效果。适用范围广:适用于DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳,尤其在回收DNA片段时表现优异。使用方法稀释:将50×TAE缓冲液用蒸馏水或去离子水稀释50倍,制备1×工作液。电泳:将稀释后的1×TAE缓冲液加入电泳槽中,确保完全覆盖凝胶。根据实验需求调整电泳电压和时间。染色与观察:电泳结束后,使用合适的核酸染料(如EB或Goldview)染色,在紫外灯下观察核酸条带。保存与注意事项保存条件:室温保存,有效期为1年。分装建议:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。 上海保藏生物技术中心是一家有着先进的发展理念,先进的管理经验,在发展过程中不断完善自己,要求自己,不断创新,时刻准备着迎接更多挑战的活力公司,在上海市等地区的化工中汇聚了大量的人脉以及客户资源,在业界也收获了很多良好的评价,这些都源自于自身的努力和大家共同进步的结果,这些评价对我们而言是**好的前进动力,也促使我们在以后的道路上保持奋发图强、一往无前的进取创新精神,努力把公司发展战略推向一个新高度,在全体员工共同努力之下,全力拼搏将共同上海保藏生物技供应和您一起携手走向更好的未来,创造更有价值的产品,我们将以更好的状态,更认真的态度,更饱满的精力去创造,去拼搏,去努力,让我们一起更好更快的成长! |