使用10×DNA Loading Buffer时,通常按照1:9(上样缓冲液:DNA样品)的比例混合λ DNA HindIII是一种经典的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它是通过将λ噬菌体DNA用HindIII限制性内切酶完全酶切后获得的,具有明确的片段大小分布。产品特性片段组成:λ DNA HindIII Marker由8条双链DNA条带组成,片段大小分别为125 bp、231 bp、564 bp、6557 bp、9416 bp13589 bp、20270 bp和23130 bp。即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接用于凝胶电泳。稳定性:室温保存一个月带型无变化,但建议低温保存以防止核酸酶污染。使用方法电泳条件:凝胶浓度:建议使用0.5%-1.0%的琼脂糖凝胶。电泳缓冲液1×TAE或0.5-1×TBE。电压:6-8 V/cm,电泳时间30-60分钟。热处理:使用前建议在65℃水浴中加热5分钟,然后在冰浴中冷却3分钟,以避免COS位点的片段结合。上样量:根据加样孔宽度,取2-5 µL加入凝胶加样孔中。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。 缓冲液应保存在室温下,避免光照和污染。由于甲酰胺具有一定的挥发性,建议在使用后立即密封保存。phi29 DNA Polymerase 是一种来源于 Bacillus subtilis 噬菌体 phi29 的重组酶,经过基因工程改造后,具有卓越的链置换和持续合成能力。它能够在等温条件下高效扩增DNA,生成长达70 kb的DNA片段。 特性与优势 高持续合成能力:phi29 DNA Polymerase 可以连续合成超过70 kb的DNA片段,无需从模板上解离。 高保真性:具有3′→5′外切酶校正活性,保真性比Taq DNA Polymerase高100倍。 链置换活性:能够高效置换DNA链,适合滚环扩增(RCA)和多重置换扩增(MDA)。 温和反应条件:反应温度通常为37-42℃,适合等温扩增。 应用场景 全基因组扩增(WGA):用于单细胞测序、病原微生物检测和宏基因组研究。 滚环扩增(RCA):生成周期性DNA纳米模板,适用于测序模板制备。 多重置换扩增(MDA):用于无偏扩增全基因组。 高GC含量模板扩增:在NGS测序中,能够提升高GC含量和复杂模板的扩增效率。 使用方法 储存条件:-20℃保存,避免反复冻融。 反应条件:37-42℃孵育1-3小时,65℃加热10分钟失活。 产品中预混了低浓度的ROX参考染料,适用于多种qPCR仪器平台,无需额外添加ROX,减少了实验误差T4 UvsY蛋白是一种来源于T4噬菌体的重组调节蛋白,分子量约为16 kDa。它在T4噬菌体的同源重组过程中发挥关键作用,通过促进T4 UvsX重组酶与单链DNA(ssDNA)的结合,增强同源重组的效率。功能与作用机制重组调节:UvsY蛋白通过与UvsX重组酶形成复合物,促进UvsX与ssDNA的结合,从而加速链置换反应。 单链DNA结合:UvsY蛋白本身具有单链DNA结合活性,能够稳定ssDNA并促进其与UvsX的结合。释放单链结合蛋白:UvsY蛋白能够从ssDNA-单链结合蛋白复合物中释放单链结合蛋白(如T4 gp32),为UvsX重组酶提供结合位点。应用场景 T4 UvsY蛋白是重组酶聚合酶扩增(RPA)技术的核心组分之一,广泛应用于等温核酸扩增。它能够显著提高RPA反应的效率和特异性,适用于快速、灵敏的病原体检测和基因分析。 二甲苯青和溴酚蓝的迁移速度不同,分别对应不同大小的 DNA 片段,可提供更准确的电泳进程指示。T4 UvsY蛋白是一种来源于噬菌体T4的重组调节蛋白,分子量约为16 kDa。它在T4 UvsX重组酶执行同源重组过程中起到关键的促进作用。具体来说,UvsY蛋白能够帮助UvsX重组酶侵入单链DNA(ssDNA)与单链结合蛋白(如T4 gp32)形成的复合物,促进gp32的释放,从而为UvsX重组酶与ssDNA的结合创造条件。此外,UvsY蛋白还可增强UvsX蛋白的ATPase活性,降低UvsX发挥活性所需的最低浓度,从而促进链置换反应。产品特性增强UvsX活性:UvsY蛋白能够显著提高UvsX重组酶的活性,促进链置换反应。无核酸酶活性:该蛋白本身不具有核酸酶活性,不会降解DNA。 等温扩增应用:UvsY蛋白是重组酶聚合酶扩增(RPA)技术的核心组分之一,能够在37-42℃的等温条件下高效扩增DNA。应用场景T4 UvsY蛋白主要用于等温扩增技术,如重组酶聚合酶扩增(RPA)。RPA技术是一种快速、灵敏的核酸检测方法,能够在37-42℃的恒温条件下进行反应,无需复杂的热循环设备。该技术广泛应用于病原体检测、基因分析以及现场快速诊断等领域。 Ultra-Long Master Mix (2×) 凭借其卓越的性能和便捷的操作流程,成为扩增选择甲酰胺加样缓冲液(2×)是一种专为RNA电泳设计的2倍浓缩上样缓冲液,广泛应用于分子生物学实验中。它主要由去离子甲酰胺、溴酚蓝、EDTA等组成,能够为RNA电泳提供稳定的环境和清晰的指示。产品特性成分:主要由去离子甲酰胺、溴酚蓝、EDTA等组成。指示剂:以溴酚蓝为指示剂,稀释至1×后比重仍然较大,加样后易下沉,且颜色清晰可见。保存条件:2-8℃避光保存,有效期为1年。使用方法稀释:将2×甲酰胺加样缓冲液与RNA样品等比例混合,稀释至1×使用。电泳操作:将混合后的样品直接加入凝胶加样孔中,进行电泳。注意事项避免RNase污染:实验过程中需佩戴无RNase手套,避免使用可能含有RNase的耗材。个人防护:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。分装使用:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。用途限制:本产品仅供科研使用,不得用于临床诊断或其他非科研用途。 其高灵敏度和稳定性使其能够检测低丰度的靶标,即使在样本量有限的情况下也能提供可靠的定量结果。在分子生物学实验中,PCR技术是不可或缺的工具,而Hot-Start Taq DNA Polymerase则是这一技术中的一颗璀璨明珠。它以其独特的机制和卓越的性能,为PCR反应的精准性和特异性提供了强有力的保障。 传统的Taq DNA聚合酶在室温下就具有活性,这意味着在PCR反应开始之前,引物可能会与模板发生非特异性结合,导致背景产物的产生,从而影响实验结果的准确性。而Hot-Start Taq DNA Polymerase通过特殊的化学修饰或物理方法,解决了这一问题。它在室温下处于“关闭”状态,只有在高温下才会被激活,从而有效避免了非特异性扩增的发生。 Hot-Start Taq DNA聚合酶的激活机制通常基于两种方式。一种是通过化学修饰,如在酶的活性位点引入可逆的化学基团,这些基团在高温下被去除,从而恢复酶的活性。另一种是通过物理方法,如将酶与抗体结合,抗体在高温下变性失活,从而释放出具有活性的Taq酶。无论哪种方式,其核心目标都是确保Taq酶在PCR反应的变性阶段才开始发挥作用。 上海保藏生物技术中心是一家有着先进的发展理念,先进的管理经验,在发展过程中不断完善自己,要求自己,不断创新,时刻准备着迎接更多挑战的活力公司,在上海市等地区的化工中汇聚了大量的人脉以及客户资源,在业界也收获了很多良好的评价,这些都源自于自身的努力和大家共同进步的结果,这些评价对我们而言是**好的前进动力,也促使我们在以后的道路上保持奋发图强、一往无前的进取创新精神,努力把公司发展战略推向一个新高度,在全体员工共同努力之下,全力拼搏将共同上海保藏生物技供应和您一起携手走向更好的未来,创造更有价值的产品,我们将以更好的状态,更认真的态度,更饱满的精力去创造,去拼搏,去努力,让我们一起更好更快的成长! |