Tris-HCl 提供稳定的缓冲环境,而 EDTA 可以螯合二价金属离子,防止核酸在电泳过程中被降解在荧光定量PCR(qPCR)实验中,准确的荧光信号检测是实验成功的关键。50× ROX Reference Dye作为一种常用的被动参考染料,为qPCR实验提供了重要的校准功能,确保了荧光信号的准确性和稳定性。 ROX Reference Dye的作用机制 ROX染料是一种被动参考荧光染料,其主要作用是校正qPCR反应中的非特异性荧光背景和孔间荧光信号的差异。在qPCR实验中,荧光信号的强度可能会受到多种因素的影响,如仪器的荧光检测系统的波动、反应体系的差异以及孔间位置的差异等。ROX染料通过提供一个稳定的荧光背景,帮助校正这些非特异性信号,从而提高定量结果的准确性和重复性。 50× ROX Reference Dye的应用 荧光定量PCR(qPCR):在qPCR实验中,ROX染料通常以一定比例添加到反应体系中。它不会参与PCR反应,但会提供一个稳定的荧光背景,用于校正仪器检测到的荧光信号。通过校正,可以更准确地反映目标基因的扩增情况,从而提高定量结果的可靠性。 多重qPCR:在多重qPCR实验中,ROX染料的作用尤为重要。 二甲苯青和溴酚蓝的迁移速度不同,分别对应不同大小的 DNA 片段,可提供更准确的电泳进程指示。在分子生物学实验中,DNA聚合酶的选择对于PCR反应的准确性和效率至关重要。Phusion DNA Polymerase以其卓越的高保真性和强大的扩增能力,成为了许多科研人员在高精度基因扩增实验中的首选酶。 Phusion DNA Polymerase是一种融合了多种酶活性的新型聚合酶,它结合了Pfu DNA聚合酶的高保真性和Taq DNA聚合酶的高效合成能力。这种独特的酶组合使得Phusion酶在DNA合成过程中能够同时保证高准确性和快速扩增。其保真度比普通Taq酶高出约50倍,甚至比Pfu酶更高,这使得它在长片段DNA扩增和需要高准确性的基因克隆实验中表现出色。 Phusion DNA Polymerase的另一个显著特点是其强大的扩增能力。它能够高效扩增长达10 kb的DNA片段,这对于许多需要扩增长片段的研究项目来说是一个巨大的优势。例如,在基因组学研究中,Phusion酶能够准确地扩增复杂的基因组区域,为后续的测序和功能分析提供高质量的模板。 在分子生物学实验中,核酸电泳是检测核酸片段大小和纯度的关键技术之一。在现代分子生物学实验室中,Taq PCR Master Mix(2×)是一种极为重要的实验试剂,它为聚合酶链式反应(PCR)的高效进行提供了强大的支持。这种预混液以其便捷性和高效性,成为了众多科研人员和实验工作者的首选。 Taq PCR Master Mix(2×)是一种预先配制好的PCR反应体系,其浓度为常规反应所需浓度的两倍。它包含了Taq DNA聚合酶、dNTPs(脱氧核苷三磷酸)、反应缓冲液以及其他必要的成分,但不包含染料。这种设计使得实验人员在进行PCR反应时,只需将模板DNA、引物和水加入到预混液中,即可快速配制好反应体系,大大简化了实验操作步骤,节省了时间和精力。 Taq PCR Master Mix(2×)的高效性主要体现在以下几个方面。首先,它所含的Taq DNA聚合酶具有出色的耐热性和高效的DNA合成能力,能够在短时间内完成目标DNA片段的扩增。其次,预混液中的反应缓冲液经过优化,能够为Taq酶提供最佳的反应环境,确保反应的高效进行。此外,dNTPs的浓度也经过精确调整,能够满足PCR反应的需求,同时避免因过量而导致的副反应。 DNAMarkerVI是一种广泛应用于生物医学研究和分子生物学实验中的DNA分子量标准双链DNA条带SYBR Green I是一种高灵敏度的荧光染料,广泛应用于核酸电泳和定量PCR等领域。其10000×浓缩液形式为实验操作提供了极大的便利,能够显著提高核酸检测的效率和灵敏度。产品特性SYBR Green I与双链DNA(dsDNA)结合后,荧光强度可增强1000倍,其检测灵敏度是传统溴化乙锭(EB)的25-100倍。这种染料在紫外光或可见光下均能发出明亮的绿色荧光,背景信号低,信噪比高,能够清晰地显示核酸条带。应用范围SYBR Green I适用于多种核酸分析方法,包括琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、脉冲电场凝胶电泳和毛细管电泳。此外,它还常用于实时定量PCR(qPCR)中,通过检测荧光强度的变化来定量分析DNA或cDNA的扩增。使用方法 SYBR Green I可以采用预染或后染的方法进行核酸染色。预染时,将10000×的SYBR Green I稀释100倍,加入样品中室温孵育10分钟后再进行电泳。后染时,将电泳后的凝胶浸泡在稀释后的染色液中,室温振荡染色10-30分钟。在qPCR中,SYBR Green I通常以0.2×到1×的终浓度加入反应体系中。 Ultra-Long Master Mix (2×) 凭借其卓越的性能和便捷的操作流程,成为扩增选择在分子生物学和生物医学研究中,荧光定量PCR(qPCR)是基因表达分析和病原体检测的核心技术之一。One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus)通过整合尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)技术,为研究人员提供了一个高效、防污染且便捷的一步法qPCR解决方案,特别适用于需要快速、准确检测RNA样本的实验场景。 一步法RT-qPCR的优势 传统的RT-qPCR实验通常需要先进行逆转录反应,将RNA转录为cDNA,然后再进行qPCR扩增。这种方法虽然能够获得准确的结果,但操作步骤繁琐,容易引入误差。而One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus)采用了一步法设计,将逆转录和qPCR扩增整合到同一个反应体系中,大大简化了操作流程,减少了人为误差,提高了实验的重复性和可靠性。 UDG技术的防污染机制 UDG技术是该试剂盒的核心亮点之一。UDG能够特异性识别并降解含有尿嘧啶(U)的DNA,从而防止实验室中残留的PCR产物污染。在qPCR反应开始前,UDG会降解引物或模板中的尿嘧啶,防止非特异性扩增。 RcView吖啶橙具有良好的膜通透性,能够自由穿过细胞膜,对细胞的生理状态干扰较小。这一特性使其适用GoldenView II 吖啶橙核酸染料是一种新型的荧光染料,专为琼脂糖凝胶电泳设计,可替代传统的溴化乙锭(EB)。它结合了吖啶橙的荧光特性,具有更高的灵敏度和安全性。产品特性GoldenView II 吖啶橙核酸染料与核酸结合后能产生很强的荧光信号,其灵敏度比EB强5-10倍。它在与双链DNA结合时发出绿色荧光,与单链RNA结合时发出橙色荧光,激发波长为488 nm,发射波长分别为530 nm(绿色)和640 nm(橙色)。使用方法GoldenView II 的使用方法与EB相同,适用于琼脂糖凝胶电泳。在电泳前,将染料稀释至工作浓度(通常为1×),加入凝胶溶液中,轻轻摇匀后倒胶。电泳结束后,使用紫外灯或蓝光灯观察荧光条带。安全性与EB相比,GoldenView II 更安全,具有更低的诱变性和毒性。它在世界卫生组织国际癌症研究机构的致癌物清单中属于3类致癌物,使用时仍需注意防护。应用范围GoldenView II 不仅适用于琼脂糖凝胶电泳,还可用于细胞染色。它能够透过细胞膜,使细胞核中的DNA和RNA染色,在荧光显微镜下可观察到细胞周期状态。 上海保藏生物技术中心是一家有着先进的发展理念,先进的管理经验,在发展过程中不断完善自己,要求自己,不断创新,时刻准备着迎接更多挑战的活力公司,在上海市等地区的化工中汇聚了大量的人脉以及客户资源,在业界也收获了很多良好的评价,这些都源自于自身的努力和大家共同进步的结果,这些评价对我们而言是**好的前进动力,也促使我们在以后的道路上保持奋发图强、一往无前的进取创新精神,努力把公司发展战略推向一个新高度,在全体员工共同努力之下,全力拼搏将共同上海保藏生物技供应和您一起携手走向更好的未来,创造更有价值的产品,我们将以更好的状态,更认真的态度,更饱满的精力去创造,去拼搏,去努力,让我们一起更好更快的成长! |