在分子生物学研究和临床检测中,快速、准确地检测RNA序列是许多实验的关键。在现代分子生物学实验中,PCR技术是不可或缺的工具,而Pfu Master Mix (2×) (Without Dye)以其卓越的高保真性和便捷性,成为了众多科研人员的首选试剂。 Pfu Master Mix (2×)是一种预配制的高浓度PCR反应体系,专门用于高保真DNA扩增。它以Pfu DNA聚合酶为核心,这种酶源自嗜热菌Pyrococcus furiosus,具有强大的3'到5'外切酶活性,能够在DNA合成过程中及时纠正错误配对的碱基。这种校正功能使得Pfu酶的保真度远高于传统的Taq酶,特别适合需要高准确性的实验,如基因克隆、突变分析和长片段扩增。 Pfu Master Mix (2×) (Without Dye)的“2×”浓度设计意味着实验人员只需将模板DNA、引物和水加入其中,即可快速配制好反应体系,大大简化了操作步骤。这种预混液不仅节省了时间,还减少了人为误差,确保了反应的均一性和稳定性。同时,无染料配方为后续实验提供了更大的灵活性。实验人员可以根据需要选择是否添加染料,或者直接用于下游应用,如克隆、测序或无染料的凝胶电泳分析。 Pfu DNA聚合酶具有3′-5′外切酶活性,能够在扩增过程中纠正碱基错配,是Taq酶的10-50倍Tris-硼酸电泳缓冲液(10×TBE)是一种高浓度的缓冲液,广泛应用于核酸电泳实验中,特别适用于DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳。它由Tris、硼酸和EDTA组成,具有强大的缓冲能力,能够维持稳定的pH值,从而提高电泳的分辨率。产品特性成分:主要由900 mM Tris-硼酸和20 mM EDTA组成。工作液浓度:稀释10倍后得到的1×TBE工作液含有90 mM Tris-硼酸和2 mM EDTApH值约为8.0。缓冲能力强:适合较长时间电泳,能够维持稳定的pH值,不易出现pH波动。高分辨率:特别适用于分离小于1 kb的DNA片段,能够提供清晰的条带。保存条件:室温保存,有效期长达12个月。使用方法稀释:将10×TBE缓冲液用蒸馏水或去离子水稀释10倍,制备1×工作液。电泳操作:将稀释后的1×TBE缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加样后开始电泳,电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的核酸染料(如EB或Goldview)染色。在紫外灯下观察核酸条带。 总之,T4 DNA聚合酶凭借其多功能性和高效性,已成为分子生物学实验中不可或缺的工具酶。热敏感性双链脱氧核糖核酸酶(Thermolabile dsDNase)是一种重组表达的酶,具有特异性剪切双链DNA(dsDNA)的能力,同时对单链DNA(ssDNA)和RNA几乎无活性。这种酶在RNA样品的纯化过程中表现出色,能够快速、安全地去除基因组DNA污染。 产品特性 特异性:仅剪切双链DNA,对单链DNA和RNA无活性。 热敏感性:在55℃加热5分钟即可完全失活,适合在反转录前快速去除RNA样品中的基因组DNA污染。 高效性:2分钟孵育即可完成消化,比牛DNase I的活力约高30倍。 来源:由毕赤酵母(Pichia pastoris)重组表达。 纯度:SDS-PAGE检测纯度≥95%,无其他DNA内切酶与外切酶活性,不含RNA酶活性。 应用场景 RNA纯化:制备不含DNA的RNA样品。 反转录前处理:在反转录前去除RNA样品中的基因组DNA污染。 体外转录后处理:去除T3、T7、SP6等RNA聚合酶催化的RNA合成后的模板DNA。 使用方法 保存条件:-20℃保存,12个月有效。 反应条件:37℃孵育2分钟。 失活条件:55℃加热5分钟。 在基因克隆和重组DNA技术中,DNA Marker II 可用于鉴定质粒酶切产物的大小,验证基因片段在分子生物学领域,DNA聚合酶是PCR技术的核心工具,而Pfu DNA Polymerase因其卓越的高保真性脱颖而出,成为精准基因扩增的首选酶。 Pfu DNA Polymerase是从嗜热菌Pyrococcus furiosus中分离纯化而来的一种耐热DNA聚合酶。与常见的Taq DNA聚合酶相比,Pfu酶最大的优势在于其具有强大的3'到5'外切酶活性,这种活性赋予了Pfu酶校正功能,使其在DNA合成过程中能够及时纠正错误配对的碱基,从而显著提高DNA扩增的准确性。研究表明,Pfu酶的保真度是Taq酶的约7倍,这意味着在扩增长片段DNA或需要高准确性的基因克隆实验中,Pfu酶能够更有效地避免突变的产生。 Pfu DNA Polymerase的耐热性也使其能够适应PCR反应中的高温变性步骤,保证在每个循环中都能稳定地合成DNA。这种耐热性与高保真性相结合,使得Pfu酶在长片段DNA扩增中表现出色。由于其校正功能减少了错误碱基的累积,Pfu酶能够更有效地合成较长的DNA片段,而不会因突变导致扩增失败。 通常每次取5 µL加入凝胶加样孔中。如果加样孔较宽,可适当增加上样量。GoldenView 吖啶橙核酸染料是一种新型的核酸染料,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于检测DNA和RNA。它是一种安全、高效的替代品,可替代传统的溴化乙锭(EB)染料。 产品特性 GoldenView 吖啶橙核酸染料与核酸结合后能产生很强的荧光信号,其灵敏度与EB相当。在紫外透射光下,双链DNA(dsDNA)呈现绿色荧光,而单链DNA(ssDNA)或RNA则呈现红色荧光。这种特性使其能够清晰地区分DNA和RNA,适用于多种核酸分析实验。 使用方法 使用GoldenView进行琼脂糖凝胶电泳时,操作方法与EB完全相同。通常在100 ml的琼脂糖凝胶溶液中加入5-10 µl的GoldenView,轻轻摇匀后倒胶,待凝胶完全凝固后进行电泳。电泳完成后,可在紫外灯下直接观察核酸条带。 安全性 GoldenView的主要成分是吖啶橙,虽然具有细胞渗透性,但通过多项致突变性试验验证,结果均为阴性。然而,为确保安全,建议操作时佩戴手套和口罩,避免接触皮肤。 如INSPECTR核酸检测技术,可在无需仪器的情况下实现多重核酸检测。一步法sgRNA合成试剂盒是一种基于体外转录技术的工具,专门用于快速、高效地合成CRISPR/Cas9系统所需的单导向RNA(sgRNA)。sgRNA是CRISPR基因编辑中的关键组分,它通过引导Cas9核酸酶到达特定的基因组位点,实现精准的DNA切割。 工作原理 该试剂盒利用T7 RNA聚合酶进行体外转录,通过合成的单链DNA模板(oligo)直接生成sgRNA。这种方法操作简单、快速,适合高通量实验。用户仅需设计并合成一条含有特定靶标序列的oligo,试剂盒提供的其他组分(如T7 RNA聚合酶、NTP混合物等)可完成sgRNA的合成。 优势 高产量:单次反应可在4小时内生成50-80μg的sgRNA,满足基因编辑的需求。 高纯度:合成的sgRNA纯度高,条带单一,可有效减少脱靶效应。 高效性:合成的sgRNA能够高效引导Cas9蛋白在特定位点切割DNA,确保基因编辑的高效率。 操作简便:仅需一步反应即可完成sgRNA的合成,适合快速实验。 应用 一步法sgRNA合成试剂盒广泛应用于基因编辑研究,包括基础生物学研究、疾病模型构建和基因治疗等。 上海保藏生物技术中心是一家有着先进的发展理念,先进的管理经验,在发展过程中不断完善自己,要求自己,不断创新,时刻准备着迎接更多挑战的活力公司,在上海市等地区的化工中汇聚了大量的人脉以及客户资源,在业界也收获了很多良好的评价,这些都源自于自身的努力和大家共同进步的结果,这些评价对我们而言是**好的前进动力,也促使我们在以后的道路上保持奋发图强、一往无前的进取创新精神,努力把公司发展战略推向一个新高度,在全体员工共同努力之下,全力拼搏将共同上海保藏生物技供应和您一起携手走向更好的未来,创造更有价值的产品,我们将以更好的状态,更认真的态度,更饱满的精力去创造,去拼搏,去努力,让我们一起更好更快的成长! |