DNAMarkerIplus在4℃条件下可稳定保存3个月-20℃下可长期保存这种稳定性确保可靠性大肠杆菌DNA连接酶(E. coli DNA Ligase)是一种在分子生物学中广泛应用的酶,最初于1967年在大肠杆菌中被发现。它能够催化DNA链的5'-磷酸和3'-羟基末端形成磷酸二酯键,从而连接相邻的DNA片段。 工作原理 大肠杆菌DNA连接酶通过NAD⁺作为辅酶,提供能量来完成连接反应。它主要作用于具有黏性末端的DNA片段,但连接平末端的效率较低。该酶在DNA复制、修复和重组过程中发挥重要作用,特别是在DNA聚合酶Ⅰ填满单链缺口后,封闭DNA双链上的缺口。 应用 大肠杆菌DNA连接酶广泛应用于分子克隆和基因工程中。它常用于连接由限制性内切酶切割产生的黏性末端DNA片段,是构建重组DNA分子的关键步骤。此外,它还被用于cDNA克隆等特定应用中。 优势与特点 专一性:大肠杆菌DNA连接酶主要作用于黏性末端,连接效率高。 依赖NAD⁺:与T4 DNA连接酶不同,它需要NAD⁺作为辅酶,而不是ATP。 热失活:该酶可以通过65℃加热20分钟失活,便于后续实验操作。 大肠杆菌DNA连接酶凭借其高效性和专一性,已成为分子生物学实验中的重要工具,尤其在需要高特异性的连接反应中表现出色。 这些变体不仅具有更高的耐热性,还能够适应不同的反应条件,满足各种实验需求。在分子生物学的微观世界中,T7 RNA聚合酶宛如一位技艺高超的“分子工程师”,以其独特的功能和卓越的性能,推动着基因转录的高效进行。 T7 RNA聚合酶来源于T7噬菌体,是一种单亚基酶。它结构简单,却拥有惊人的转录效率。与细胞内的多亚基RNA聚合酶相比,T7 RNA聚合酶无需复杂的组装和调控,就能迅速启动转录过程。它能够特异性地识别T7噬菌体的启动子序列,一旦结合,便如同被按下启动键,快速而准确地合成RNA分子。 这种酶的高效性源于其独特的催化机制。它在转录过程中能够稳定地结合模板DNA,减少滑动和脱落的概率,从而保证了RNA合成的连续性和准确性。T7 RNA聚合酶不仅在噬菌体的生命周期中发挥着关键作用,还在生物技术领域大放异彩。科学家们利用它开发出了高效的体外转录系统,用于合成特定的RNA分子,如mRNA、tRNA等。这些合成的RNA可用于研究基因表达调控、蛋白质合成机制,以及开发新型的基因治疗载体。 T7 RNA聚合酶还具有很强的耐受性,能够在较宽的温度和pH范围内保持活性。这使得它在各种实验条件下都能稳定工作,成为实验室中不可或缺的工具酶。 溴酚蓝和二甲苯青FF作为示踪染料,能够在电泳过程中指示RNA的迁移位置。Tris-乙酸电泳缓冲液(50×TAE, RNase free)是一种专为RNA电泳设计的高浓度缓冲液,经过RNase-free处理,能够有效避免RNA降解,确保电泳结果的可靠性。产品特性成分:主要由2M Tris-acetate、50 mM EDTA和DEPC处理水组成。工作液浓度:稀释50倍后的1×TAE工作液含有40 mM Tris-acetate和1 mM EDTA,pH值约为8.0。 无RNase污染:经过DEPC处理,确保无RNase污染,适用于RNA电泳。稳定性高:室温保存,有效期长达12个月。使用方法稀释:将50×TAE缓冲液用DEPC处理水稀释50倍,制备1×工作液。电泳操作:将稀释后的1×TAE缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加样后开始电泳,电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的RNA染料(如EB或Goldview)染色。在紫外灯下观察RNA条带。保存与注意事项保存条件:室温保存,开封后建议尽快使用。避免RNase污染:使用时需佩戴无RNase手套,避免使用可能含有RNase的耗材。 二甲苯青(Xylene Cyanol FF):部分配方中还含有二甲苯青,用于更广泛的示踪。在细胞内复杂的蛋白质调控网络中,泛素化是一种关键的蛋白质修饰过程,它在蛋白质降解、细胞周期调控、信号转导等生物学过程中发挥着重要作用。泛素结合酶E2L3(Ubiquitin Conjugating Enzyme E2L3,UBE2L3)作为泛素化途径中的核心成员之一,承担着将泛素从激活酶E1传递到泛素连接酶E3的重要任务,是泛素化反应的“精准调控者”。 泛素结合酶E2L3的特性 泛素结合酶E2L3(UBE2L3)是一种高度特异性的酶,能够特异性地识别并结合由E1激活的泛素。在泛素化反应的第二步中,UBE2L3通过其活性位点的半胱氨酸残基与泛素形成共价键,从而将泛素从E1转移到自身。这一过程为后续的泛素连接酶E3介导的泛素转移提供了必要的中间体。UBE2L3在多种细胞类型中广泛表达,并在多种生物学过程中发挥重要作用,特别是在免疫应答和细胞周期调控中。 广泛的应用 UBE2L3在分子生物学研究中具有广泛的应用。例如,在体外泛素化实验中,UBE2L3被用于研究泛素化过程中的关键步骤,帮助科学家们理解泛素从E1到E3的传递机制。 这种机制的研究不仅有助于理解骨骼和组织的发育过程,还为开发新的治疗策略提供了理论基础。碱性琼脂糖凝胶电泳缓冲液(10×)是一种10倍浓缩的碱性DNA电泳缓冲液,主要由0.5 M NaOH和10 mM EDTA组成,呈强碱性。它广泛应用于碱性琼脂糖凝胶电泳实验中。产品特性成分:主要由0.5 M NaOH和10 mM EDTA组成。保存条件:室温保存,有效期为12个月。用途:主要用于碱性琼脂糖凝胶电泳。包装:通常以500 mL包装提供。使用方法稀释:使用无菌蒸馏水或去离子水将10×缓冲液稀释至1×工作液。制备琼脂糖凝胶:在三角烧瓶或玻璃瓶中加入准确量的琼脂糖粉和定量的水。加热使琼脂糖完全溶解,注意搅拌防止烧焦。冷却至55°C后,加入0.1倍体积的10×碱性凝胶电泳缓冲液,迅速灌制凝胶。电泳操作:将稀释后的1×缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加入样品后开始电泳,建议使用小于3.5 V/cm的电压。注意事项分装使用:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。安全操作:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。废弃物处理:使用后的废弃物应按照相关法律法规进行处理。 二甲苯青和溴酚蓝的迁移速度不同,分别对应不同大小的 DNA 片段,可提供更准确的电泳进程指示。在细胞内复杂的蛋白质调控网络中,泛素化是一种关键的蛋白质修饰过程,它在蛋白质降解、细胞周期调控、信号转导等生物学过程中发挥着重要作用。重组人源泛素结合酶E2D1(Recombinant Human Ubiquitin Conjugating Enzyme E2D1,UBE2D1)作为泛素化途径中的核心成员之一,承担着将泛素从激活酶E1传递到泛素连接酶E3的重要任务,是泛素化反应的关键“传递者”。 重组人源泛素结合酶E2D1的特性 重组人源泛素结合酶E2D1(UBE2D1)是一种通过基因工程技术生产的酶,具有与天然UBE2D1相同的活性。UBE2D1能够特异性地识别并结合由E1激活的泛素。在泛素化反应的第二步中,UBE2D1通过其活性位点的半胱氨酸残基与泛素形成共价键,从而将泛素从E1转移到自身。这一过程为后续的泛素连接酶E3介导的泛素转移提供了必要的中间体。 广泛的应用 重组人源UBE2D1在分子生物学研究中具有广泛的应用。例如,在体外泛素化实验中,UBE2D1被用于研究泛素化过程中的关键步骤,帮助科学家们理解泛素从E1到E3的传递机制。 上海保藏生物技术中心是一家有着先进的发展理念,先进的管理经验,在发展过程中不断完善自己,要求自己,不断创新,时刻准备着迎接更多挑战的活力公司,在上海市等地区的化工中汇聚了大量的人脉以及客户资源,在业界也收获了很多良好的评价,这些都源自于自身的努力和大家共同进步的结果,这些评价对我们而言是**好的前进动力,也促使我们在以后的道路上保持奋发图强、一往无前的进取创新精神,努力把公司发展战略推向一个新高度,在全体员工共同努力之下,全力拼搏将共同上海保藏生物技供应和您一起携手走向更好的未来,创造更有价值的产品,我们将以更好的状态,更认真的态度,更饱满的精力去创造,去拼搏,去努力,让我们一起更好更快的成长! |