dNTP Mix是一种由 dATP、dCTP、dGTP 和 dTTP 组成的等摩尔混合溶液λ核酸外切酶(Lambda Exonuclease)是一种来源于λ噬菌体的核酸外切酶,能够特异性地作用于双链DNA,沿5′→3′方向逐步去除5′端的单核苷酸。这种酶在分子生物学实验中具有广泛的应用。 工作原理 λ核酸外切酶的最适底物是5′端磷酸化的双链DNA。它能够高效地从5′端逐步降解双链DNA,生成单链DNA或单核苷酸。该酶对单链DNA和非磷酸化的双链DNA底物的降解效率较低,分别只有磷酸化双链DNA的1%和5%。此外,λ核酸外切酶不能从DNA的切刻或缺口处起始消化。 应用场景 单链DNA制备:通过降解双链DNA的一条链,λ核酸外切酶可用于制备单链DNA。例如,在PCR产物中,使用5′端磷酸化的引物,可以通过λ核酸外切酶特异性降解其中一条链,从而获得单链DNA。 DNA末端修饰:在某些克隆实验中,λ核酸外切酶可用于去除DNA片段的5′端核苷酸,以实现特定的末端修饰。 基因编辑:在基因编辑技术中,λ核酸外切酶可用于处理线性化质粒,以提高同源重组的效率。 DNA损伤研究:λ核酸外切酶可用于研究DNA损伤和修复机制,通过降解损伤的DNA片段来模拟细胞内的DNA修复过程。 通过优化的缓冲体系和酶组合,试剂盒在非特异性扩增体系中仍能保持单峰的熔解曲线,确保了结果的高特异性DNA尿素加样缓冲液(2×)是一种专为变性核酸电泳设计的2倍浓缩上样缓冲液,广泛应用于分子生物学实验中。它主要由Tris、EDTA、甘油、尿素等组成,能够有效解除DNA的二级结构,保持DNA的单链构型。产品特性成分:主要由Tris、EDTA、甘油、尿素等组成,不含溴酚蓝。使用特点:加样后易下沉,便于电泳操作。保存条件:-20℃避光保存,有效期为12个月。用途:仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他非科研用途。使用方法稀释:将2×DNA尿素加样缓冲液与待测核酸样品液按照1:1比例稀释。变性处理:将混合后的样品在95°C水浴中处理5分钟,然后在冰上冷却。电泳操作:将处理后的样品直接加入凝胶加样孔中,进行电泳。注意事项分装使用:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。安全操作:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。用途限制:本产品仅供科研使用,不得用于临床诊断或其他非科研用途。DNA尿素加样缓冲液(2×)凭借其高效、稳定和清晰的指示特性,成为变性核酸电泳实验中的理想选择。 4S Green Plus 的使用方法灵活,既可用于凝胶前染色,也可用于凝胶后染色。10 mg/ml的溴化乙锭(Ethidium Bromide,EB)溶液是一种常用的核酸染料,广泛应用于分子生物学实验中,尤其是在DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳检测中。 EB是一种多环芳烃荧光小分子,能够嵌入核酸的碱基对之间。当EB与双链DNA(dsDNA)结合时,荧光强度会增强约25倍,与双链RNA(dsRNA)结合时,荧光强度增强约21倍。这种特性使得EB在低浓度下(如10 µg/ml)染色后无需脱色处理,即可在紫外光下清晰观察到核酸条带。 在使用10 mg/ml EB溶液进行电泳时,通常有两种染色方法: 电泳前染色:在制胶时加入EB,使其工作浓度达到0.5 µg/ml。例如,每100 ml的琼脂糖凝胶溶液中加入5-10 µL的10 mg/ml EB溶液,混匀后倒胶。 电泳后染色:将电泳后的凝胶浸泡在含有0.5 µg/ml EB的电泳缓冲液或水中,染色15-45分钟。 需要注意的是,EB具有较强的诱变性和毒性,操作时应佩戴手套和实验服,避免直接接触皮肤。此外,EB废液应按照实验室标准进行净化处理后再丢弃,以避免环境污染。 二甲苯青和溴酚蓝的迁移速度不同,分别对应不同大小的 DNA 片段,可提供更准确的电泳进程指示。磁珠法DNA凝胶回收试剂盒是一种基于磁性纳米技术的核酸纯化工具,能够从琼脂糖凝胶中快速、高效地回收DNA片段,同时去除杂质,确保回收的DNA纯度高、质量好。工作原理该试剂盒利用特制的磁珠表面的功能基团,在特定缓冲液条件下与DNA特异性结合。通过磁场分离,携带DNA的磁珠可以快速从溶液中分离出来,去除杂质后,DNA可以从磁珠上洗脱下来,用于后续实验。产品特点高效回收:适用于从TAE和TBE琼脂糖凝胶中回收100 bp至30 kb的DNA片段,回收率可达70%-80%,尤其对大片段DNA的回收效果优于传统方法。操作简便:无需离心或抽滤,整个回收过程仅需20-30分钟,适合高通量操作。纯度高:有效去除琼脂糖、引物二聚体、dNTP等杂质,回收的DNA可直接用于酶切、连接、测序等下游实验。适用范围广:适用于多种DNA样品类型,包括PCR产物、质粒DNA酶切片段等。应用场景磁珠法DNA凝胶回收试剂盒广泛应用于分子生物学、遗传学、微生物学等领域的核酸纯化,特别适用于需要高纯度DNA的实验,如基因克隆、基因编辑、基因表达分析等。 更值得一提的是,该试剂中加入了UDG(尿嘧啶DNA糖基化酶)成分。BPTE电泳缓冲液(1×, RNase free)是一种专为RNA电泳设计的缓冲液,广泛应用于分子生物学实验中。它主要由PIPES、TRIS、EDTA等成分组成,经过0.1% DEPC处理,确保无RNase污染。产品特性无RNase污染:经过DEPC处理,确保无RNase污染,适用于RNA电泳。即用型设计:1×浓度,无需稀释,直接使用。稳定性高:室温保存,有效期长达12个月。pH值稳定:最终pH值约为6.5,适合RNA的稳定迁移。使用方法准备凝胶:根据实验需求,制备琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶。加入缓冲液:将BPTE电泳缓冲液(1×, RNase free)加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。 电泳条件:建议使用1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶,电泳电压4-10 V/cm,电泳时间根据RNA片段大小调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的RNA染料(如Goldview或EB)染色,在紫外灯下观察RNA条带。 适用于多种实验条件,包括不同的琼脂糖浓度和电泳电压(4-10 V/cm),能够根据实验需求灵活调整在荧光定量PCR(qPCR)实验中,探针法因其高特异性和高灵敏度而被广泛应用于基因表达分析、病原体检测和基因拷贝数变异分析等领域。然而,某些qPCR仪器(如ABI系列)需要低浓度的ROX参考染料来校正孔间荧光信号的差异。Probe qPCR Mix (2×, Low ROX)正是为这些特定需求而设计的优化试剂,它结合了高效的探针法qPCR反应体系和低浓度ROX的校正功能,为精准定量提供了有力支持。 低浓度ROX的必要性 在qPCR实验中,ROX参考染料通常用于校正荧光信号的非特异性变化,尤其是在高通量实验中。某些qPCR仪器(如ABI 7500、7900等)在低浓度ROX存在时能够更好地校正孔间差异,从而提高定量的准确性和重复性。Probe qPCR Mix (2×, Low ROX)中的ROX浓度经过精确调整,适用于这些需要低浓度ROX的仪器,同时避免了高浓度ROX可能带来的背景荧光干扰。 产品特点 优化的反应体系:Probe qPCR Mix (2×, Low ROX)含有优化的反应缓冲液、dNTPs、Mg²⁺、热启动Taq DNA聚合酶以及其他必要的成分。 上海保藏生物技术中心是一家有着先进的发展理念,先进的管理经验,在发展过程中不断完善自己,要求自己,不断创新,时刻准备着迎接更多挑战的活力公司,在上海市等地区的化工中汇聚了大量的人脉以及客户资源,在业界也收获了很多良好的评价,这些都源自于自身的努力和大家共同进步的结果,这些评价对我们而言是**好的前进动力,也促使我们在以后的道路上保持奋发图强、一往无前的进取创新精神,努力把公司发展战略推向一个新高度,在全体员工共同努力之下,全力拼搏将共同上海保藏生物技供应和您一起携手走向更好的未来,创造更有价值的产品,我们将以更好的状态,更认真的态度,更饱满的精力去创造,去拼搏,去努力,让我们一起更好更快的成长! |