后染时,将电泳后的凝胶浸泡在稀释后的染色液中,室温振荡染色10-30分钟。2×TBE-Urea 上样缓冲液是一种专为变性核酸电泳设计的试剂,能够有效解除核酸的二级结构,使其保持单链状态,从而实现更清晰的电泳分离效果。组成成分该缓冲液的主要成分包括:尿素(Urea):用于解除核酸的二级结构,保持其单链构型。 溴酚蓝(Bromophenol Blue) 和 二甲苯青(Xylene Cyanol FF):作为示踪染料,用于观察电泳的进程。Tris、硼酸和 EDTA:维持电泳过程中的缓冲体系,确保电泳条件的稳定。聚蔗糖(Ficoll):增加样品密度,帮助样品沉入凝胶孔中。使用方法 样品处理:将 2×TBE-Urea 上样缓冲液与待测核酸样品按 1:1 比例混合,70℃加热 3-5 分钟,使核酸充分变性。上样与电泳:处理后的样品可直接加入变性聚丙烯酰胺凝胶的加样孔中,进行电泳。应用场景2×TBE-Urea 上样缓冲液主要用于单链 DNA(ssDNA)和 RNA 的变性凝胶电泳,广泛应用于基因分型检测(如 SSR 标记、AFLP、RFLP 等)。它不适用于非变性凝胶电泳或蛋白电泳。储存条件该缓冲液应冷冻保存(-20℃),以保证其稳定性和有效性。 建议使用2.0%-2.5%的琼脂糖凝胶,电泳电压4-10 V/cm,电泳时间20-25分钟。2× DNA/RNA变性上样缓冲液是一种专为核酸电泳设计的浓缩缓冲液,广泛应用于DNA和RNA的变性凝胶电泳。它通过变性处理,确保核酸在电泳过程中以单链形式迁移,从而实现更清晰的分离效果。 组成成分 2× DNA/RNA变性上样缓冲液的主要成分包括: 甲酰胺:用于变性核酸,确保核酸在电泳中以单链形式迁移。 溴酚蓝和二甲苯青:作为电泳指示剂,便于观察电泳进程。 SDS:一种阴离子表面活性剂,有助于核酸的变性。 EDTA:螯合金属离子,防止核酸降解。 使用方法 样品混合:将DNA或RNA样品与2×变性上样缓冲液按1:1的比例混合,使最终浓度为1×。 变性处理:将混合后的样品在95℃加热5分钟,然后迅速冷却至冰上。 上样:将处理后的样品加入凝胶加样孔中。 电泳:在适当的电压下进行电泳,直至指示剂迁移至凝胶的合适位置。 优势 高效变性:确保核酸在电泳过程中以单链形式迁移,提高分离效果。 清晰指示:溴酚蓝和二甲苯青作为指示剂,便于实时观察电泳进程。 高纯度:无RNase污染,确保RNA样品的完整性。 适用范围广:适用于DNA和RNA的变性电泳,包括琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶。 6×DNA Loading Buffer是一种六倍浓缩的上样缓冲液,主要用于DNA凝胶电泳。10 mg/ml的溴化乙锭(Ethidium Bromide,EB)溶液是一种常用的核酸染料,广泛应用于分子生物学实验中,尤其是在DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳检测中。 EB是一种多环芳烃荧光小分子,能够嵌入核酸的碱基对之间。当EB与双链DNA(dsDNA)结合时,荧光强度会增强约25倍,与双链RNA(dsRNA)结合时,荧光强度增强约21倍。这种特性使得EB在低浓度下(如10 µg/ml)染色后无需脱色处理,即可在紫外光下清晰观察到核酸条带。 在使用10 mg/ml EB溶液进行电泳时,通常有两种染色方法: 电泳前染色:在制胶时加入EB,使其工作浓度达到0.5 µg/ml。例如,每100 ml的琼脂糖凝胶溶液中加入5-10 µL的10 mg/ml EB溶液,混匀后倒胶。 电泳后染色:将电泳后的凝胶浸泡在含有0.5 µg/ml EB的电泳缓冲液或水中,染色15-45分钟。 需要注意的是,EB具有较强的诱变性和毒性,操作时应佩戴手套和实验服,避免直接接触皮肤。此外,EB废液应按照实验室标准进行净化处理后再丢弃,以避免环境污染。 Tris-HCl 提供稳定的缓冲环境,而 EDTA 可以螯合二价金属离子,防止核酸在电泳过程中被降解在生物实验中,核酸染色是检测DNA和RNA的重要步骤,但传统染料如溴化乙锭(EB)具有致癌性,对实验人员和环境存在潜在危害。4S Green Plus 无毒核酸染料作为一种新型的EB替代品,为科研人员提供了一种安全、高效且环保的选择。 4S Green Plus 是一种无毒、非致癌的核酸染料,其灵敏度与EB相当,能够检测到低浓度的核酸分子。它在295 nm和490 nm处具有荧光激发最大值,与结合DNA的EB荧光激发点相近,可在紫外灯或蓝光LED下清晰观察DNA条带。这种染料不仅安全性高,还具有高特异性和荧光稳定性,不会与其他细胞成分结合,且在实验过程中荧光信号稳定。 4S Green Plus 的使用方法灵活,既可用于凝胶前染色,也可用于凝胶后染色。在凝胶前染色时,将染料加入冷却至50-60℃的琼脂糖溶液中;在凝胶后染色时,每100 mL染色溶液中加入20-30 μL染料,染色30分钟后脱色即可。此外,4S Green Plus 适合用于琼脂糖凝胶中的双链DNA、单链DNA和RNA的检测。 Plant Direct PCR Master Mix (2×) 是一种专为植物样本设计的预混液在现代分子生物学实验室中,Taq PCR Master Mix(2×)是一种极为重要的实验试剂,它为聚合酶链式反应(PCR)的高效进行提供了强大的支持。这种预混液以其便捷性和高效性,成为了众多科研人员和实验工作者的首选。 Taq PCR Master Mix(2×)是一种预先配制好的PCR反应体系,其浓度为常规反应所需浓度的两倍。它包含了Taq DNA聚合酶、dNTPs(脱氧核苷三磷酸)、反应缓冲液以及其他必要的成分,但不包含染料。这种设计使得实验人员在进行PCR反应时,只需将模板DNA、引物和水加入到预混液中,即可快速配制好反应体系,大大简化了实验操作步骤,节省了时间和精力。 Taq PCR Master Mix(2×)的高效性主要体现在以下几个方面。首先,它所含的Taq DNA聚合酶具有出色的耐热性和高效的DNA合成能力,能够在短时间内完成目标DNA片段的扩增。其次,预混液中的反应缓冲液经过优化,能够为Taq酶提供最佳的反应环境,确保反应的高效进行。此外,dNTPs的浓度也经过精确调整,能够满足PCR反应的需求,同时避免因过量而导致的副反应。 5×RNA Loading Buffer适用于多种RNA电泳实验,包括非变性琼脂糖凝胶电泳和变性琼脂电泳级橙黄G溶液(1%)是一种专为核酸电泳设计的上样液和生物染色剂母液。它主要由1%的甲基橙和去离子水组成,具有良好的稳定性和实用性。产品特性成分:1%甲基橙、去离子水。用途:主要用于核酸电泳的上样液和生物染色。泳动率:在0.5-1.4%的琼脂糖凝胶中,其泳动率相当于50 bp的双链DNA。保存条件:室温避光保存,有效期为12个月。使用方法电泳上样液:将橙黄G溶液与核酸样品混合后直接用于电泳,橙黄G作为示踪剂,可帮助观察样品的迁移情况。生物染色:可用于生物样品的染色,具体使用方法需根据实验需求调整。注意事项毒性:橙黄G溶液有轻微毒性,操作时需谨慎,避免接触皮肤和吸入。保存:建议在室温下避光保存,以延长产品有效期。用途限制:仅供科研使用,不得用于临床诊断。电泳级橙黄G溶液(1%)凭借其高效、稳定的特性,成为核酸电泳实验中的重要工具,广泛应用于分子生物学研究中。 上海保藏生物技术中心是一家有着先进的发展理念,先进的管理经验,在发展过程中不断完善自己,要求自己,不断创新,时刻准备着迎接更多挑战的活力公司,在上海市等地区的化工中汇聚了大量的人脉以及客户资源,在业界也收获了很多良好的评价,这些都源自于自身的努力和大家共同进步的结果,这些评价对我们而言是**好的前进动力,也促使我们在以后的道路上保持奋发图强、一往无前的进取创新精神,努力把公司发展战略推向一个新高度,在全体员工共同努力之下,全力拼搏将共同上海保藏生物技供应和您一起携手走向更好的未来,创造更有价值的产品,我们将以更好的状态,更认真的态度,更饱满的精力去创造,去拼搏,去努力,让我们一起更好更快的成长! |