SYBR Green I是qPCR中常用的荧光染料，能够实时监测DNA扩增过程，广泛用于基因表达分析

ris-磷酸电泳缓冲液(10×TPE)是一种高浓度的缓冲液，广泛应用于核酸电泳实验中，特别适用于琼脂糖凝胶电泳。它由Tris、磷酸和EDTA组成，能够为核酸电泳提供稳定的pH环境和良好的导电性。产品特性成分：主要由900 mM Tris-磷酸和20 mM EDTA组成。工作液浓度：稀释10倍后得到的1×TPE工作液含有90 mM Tris-磷酸和2 mM EDTA，pH值约为8.0。缓冲能力强：适合较长时间电泳，能够维持稳定的pH值，不易出现pH波动。高分辨率：特别适用于分离小于1 kb的DNA片段，能够提供清晰的条带。保存条件：室温保存，有效期长达12个月。使用方法稀释：将10×TPE缓冲液用蒸馏水或去离子水稀释10倍，制备1×工作液。电泳操作：将稀释后的1×TPE缓冲液加入电泳槽中，确保缓冲液完全覆盖凝胶。加样后开始电泳，电泳条件根据实验需求调整。染色与观察：电泳结束后，使用合适的核酸染料（如EB或Goldview）染色。在紫外灯下观察核酸条带。注意事项沉淀处理：如果出现沉淀，可置于37℃水浴中使其溶解，不影响使用。

3'-羟基攻击5'-磷酸末端，形成新的磷酸二酯键，从而完成DNA片段的连接。

在分子生物学和生物医学研究中，荧光定量PCR（qPCR）是基因表达分析和病原体检测的核心技术之一。One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus)通过整合尿嘧啶-DNA糖基化酶（UDG）技术，为研究人员提供了一个高效、防污染且便捷的一步法qPCR解决方案，特别适用于需要快速、准确检测RNA样本的实验场景。 一步法RT-qPCR的优势 传统的RT-qPCR实验通常需要先进行逆转录反应，将RNA转录为cDNA，然后再进行qPCR扩增。这种方法虽然能够获得准确的结果，但操作步骤繁琐，容易引入误差。而One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus)采用了一步法设计，将逆转录和qPCR扩增整合到同一个反应体系中，大大简化了操作流程，减少了人为误差，提高了实验的重复性和可靠性。 UDG技术的防污染机制 UDG技术是该试剂盒的核心亮点之一。UDG能够特异性识别并降解含有尿嘧啶（U）的DNA，从而防止实验室中残留的PCR产物污染。在qPCR反应开始前，UDG会降解引物或模板中的尿嘧啶，防止非特异性扩增。

它在免疫系统中发挥着重要作用，尤其是在胸腺内T细胞的发育和选择过程中。

在人类细胞的复杂调控网络中，Epigen（表皮生长因子样蛋白）是一种重要的表皮生长因子（EGF）家族成员，广泛参与细胞增殖、分化和存活等过程。Epigen在多种生理和病理过程中发挥着关键作用，是生物医学研究中的重要对象。 Epigen的结构与功能 Epigen是一种分泌性糖蛋白，其结构中含有一个EGF样结构域，能够与表皮生长因子受体（EGFR）结合，激活下游信号通路。通过激活EGFR，Epigen能够促进细胞的增殖和存活，特别是在上皮细胞和内皮细胞中。此外，Epigen还能够调节细胞间的黏附和迁移，对组织的形成和修复具有重要作用。 在生理过程中的作用 Epigen在多种生理过程中发挥着重要作用。例如，在皮肤和黏膜的维持中，Epigen能够促进表皮细胞的增殖和分化，维持皮肤和黏膜的完整性和功能。在伤口愈合过程中，Epigen的表达显著增加，它能够促进受损组织的修复和再生，加速伤口的闭合。 在疾病中的作用 Epigen在多种疾病中也发挥着重要作用。在某些癌症中，Epigen的高表达与肿瘤的侵袭和转移相关。

组氨酸标签（His-tag）是一种常用的蛋白质工程技术，它使得蛋白质的纯化和检测更加高效。

T4 UvsX Recombinase是一种来源于T4噬菌体的重组酶，属于RecA/Rad51家族的同源体，广泛应用于重组酶聚合酶扩增（Recombinase Polymerase Amplification, RPA）技术中。该酶能够与单链DNA（ssDNA）结合并形成核酸蛋白复合物，通过寻找与双链DNA（dsDNA）的同源序列进行链置换反应，从而实现等温条件下的高效DNA扩增。产品特性高效结合与置换：T4 UvsX Recombinase能够稳定ssDNA，并在dsDNA中寻找同源序列，完成链置换反应。无核酸酶活性：该酶本身不具有核酸酶活性，不会降解DNA。温和反应条件：可在37-42℃的等温条件下进行反应，适合快速、灵敏的核酸扩增。应用场景T4 UvsX Recombinase是RPA技术的核心组分之一，广泛应用于以下领域：病原体检测：可用于检测多种DNA和RNA病原体，如中东呼吸综合征（MERS）、HIV-1、埃博拉病毒和COVID-19，检测下限通常低于100个拷贝。即时诊断（POCT）：因其快速、简便的特点，非常适合现场快速诊断试剂的开发。

而蛋白A则是一种能够与免疫球蛋白G（IgG）特异性结合的蛋白质，广泛应用于抗体纯化等领域。

T4 RNA连接酶1（T4 RNA Ligase 1）是一种ATP依赖的酶，能够催化单链RNA、单链DNA或单核苷酸分子间或分子内5'-P末端与3'-OH末端之间形成磷酸二酯键。这种酶在RNA分子间的连接效率最高，其次为DNA与RNA之间的连接，而DNA分子间的连接效率最低。 工作原理 T4 RNA连接酶1的催化过程包括三个步骤： 酶与ATP反应，生成酶-AMP中间产物并释放焦磷酸。 AMP从中间产物转移到核酸的5'磷酸末端，形成腺苷酰化核酸中间产物。 另一核酸的3'羟基进攻腺苷酰化核酸中间产物的5'磷酸末端，形成3'-5'磷酸二酯键并释放AMP。 产品特点 高纯度与稳定性：蛋白纯度超过99%，酶活性高，稳定性好。 无核酸酶污染：经过DEPC处理，确保无RNase、DNase和蛋白酶污染。 适用范围广：可用于RNA和RNA之间的连接、RNA和单核苷酸之间的连接（用于3'末端标记）、RNA和DNA之间的连接，以及DNA的环化连接。 应用场景 miRNA检测：通过将miRNA首尾相连形成circRNA，结合RT-qPCR技术，提高检测灵敏度。

此外，TRAIL还参与调节免疫反应，通过清除病毒感染的细胞，帮助维持免疫系统的平衡。

大肠杆菌DNA连接酶（E. coli DNA Ligase）是一种在分子生物学中广泛应用的酶，最初于1967年在大肠杆菌中被发现。它能够催化DNA链的5'-磷酸和3'-羟基末端形成磷酸二酯键，从而连接相邻的DNA片段。 工作原理 大肠杆菌DNA连接酶通过NAD⁺作为辅酶，提供能量来完成连接反应。它主要作用于具有黏性末端的DNA片段，但连接平末端的效率较低。该酶在DNA复制、修复和重组过程中发挥重要作用，特别是在DNA聚合酶Ⅰ填满单链缺口后，封闭DNA双链上的缺口。 应用 大肠杆菌DNA连接酶广泛应用于分子克隆和基因工程中。它常用于连接由限制性内切酶切割产生的黏性末端DNA片段，是构建重组DNA分子的关键步骤。此外，它还被用于cDNA克隆等特定应用中。 优势与特点 专一性：大肠杆菌DNA连接酶主要作用于黏性末端，连接效率高。 依赖NAD⁺：与T4 DNA连接酶不同，它需要NAD⁺作为辅酶，而不是ATP。 热失活：该酶可以通过65℃加热20分钟失活，便于后续实验操作。 大肠杆菌DNA连接酶凭借其高效性和专一性，已成为分子生物学实验中的重要工具，尤其在需要高特异性的连接反应中表现出色。

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