缓冲液中的 Tris-HCl 和 EDTA 组分能够维持电泳过程中的稳定环境。T4 RNA连接酶1(T4 RNA Ligase 1)是一种ATP依赖的酶,能够催化单链RNA、单链DNA或单核苷酸分子间或分子内5'-P末端与3'-OH末端之间形成磷酸二酯键。这种酶在RNA分子间的连接效率最高,其次为DNA与RNA之间的连接,而DNA分子间的连接效率最低。 工作原理 T4 RNA连接酶1的催化过程包括三个步骤: 酶与ATP反应,生成酶-AMP中间产物并释放焦磷酸。 AMP从中间产物转移到核酸的5'磷酸末端,形成腺苷酰化核酸中间产物。 另一核酸的3'羟基进攻腺苷酰化核酸中间产物的5'磷酸末端,形成3'-5'磷酸二酯键并释放AMP。 产品特点 高纯度与稳定性:蛋白纯度超过99%,酶活性高,稳定性好。 无核酸酶污染:经过DEPC处理,确保无RNase、DNase和蛋白酶污染。 适用范围广:可用于RNA和RNA之间的连接、RNA和单核苷酸之间的连接(用于3'末端标记)、RNA和DNA之间的连接,以及DNA的环化连接。 应用场景 miRNA检测:通过将miRNA首尾相连形成circRNA,结合RT-qPCR技术,提高检测灵敏度。 其中,2500 bp条带的浓度较高(约100 ng/5 µL),显示为加亮带,便于在电泳后快速定位。2×TBE-Urea 上样缓冲液是一种专门用于变性核酸电泳的试剂,能够有效解除核酸的二级结构,使其保持单链构型,从而实现更清晰的电泳分离效果。组成成分该缓冲液的主要成分包括:尿素(Urea):用于解除核酸的二级结构,保持核酸的单链状态。 溴酚蓝(Bromophenol Blue) 和 二甲苯青(Xylene Cyanol FF):作为示踪染料用于观察电泳的进程。Tris、硼酸和 EDTA:维持电泳过程中的缓冲体系,确保电泳条件的稳定。聚蔗糖(Ficoll):增加样品密度,帮助样品沉入凝胶孔中。使用方法样品处理:将 2×TBE-Urea 上样缓冲液与待测核酸样品按 1:1 比例混合70℃加热 3-5 分钟,使核酸充分变性,之后立即置于冰上冷却。上样与电泳:将处理后的样品加入变性聚丙烯酰胺凝胶的加样孔中,进行电泳。应用场景2×TBE-Urea 上样缓冲液主要用于单链 DNA(ssDNA)和 RNA 的变性凝胶电泳,广泛应用于基因分型检测(如 SSR 标记、AFLP、RFLP 等)。它不适用于非变性凝胶电泳或蛋白电泳。 Cre重组酶通过与LoxP位点的反向重复序列结合形成二聚体,进而形成四聚体复合物。在分子生物学和生物医学研究中,荧光定量PCR(qPCR)是一种关键的基因表达分析技术。其中,基于探针(Probe)的qPCR方法因其高特异性和高灵敏度而被广泛应用于各种实验场景。Probe qPCR Mix (2×)作为一种专为探针法qPCR设计的预混液,为研究人员提供了一个高效、便捷且可靠的实验解决方案。 Probe qPCR Mix (2×)的核心优势 Probe qPCR Mix (2×)是一种高浓度的预混液,专为探针法qPCR实验设计。它含有优化的反应缓冲液、dNTPs、Mg²⁺、热启动Taq DNA聚合酶以及其他必要的成分。这种预混液的“2×”浓度设计意味着实验人员只需将模板DNA、引物和荧光探针加入其中,即可快速配制好反应体系,大大简化了操作流程。 高特异性和高灵敏度 探针法qPCR的核心在于使用特异性荧光探针来检测目标DNA序列。这种探针通常设计为与目标序列完全互补,并在PCR扩增过程中与目标DNA结合。当探针与目标DNA结合时,荧光信号会显著增强,从而实现对目标基因的高特异性检测。 微球菌核酸酶本身是一种能够降解核酸的酶,具有高效、特异性强的特点。phi29 DNA Polymerase 是一种源自 Bacillus subtilis 噬菌体 phi29 的重组酶,具有极高的过程性(processivity)和链置换活性,能够在等温条件下高效扩增DNA。这种酶还具有3'→5'外切酶(校对)活性,能够确保DNA合成的高保真性。特性与优势 高过程性:phi29 DNA Polymerase 可以合成超过70 kb的长DNA片段,无需辅助蛋白。链置换活性:强大的链置换能力使其能够在等温条件下高效扩增DNA。高保真性:3'→5'外切酶活性能够实时校正错误,确保DNA复制的高准确性。等温扩增:无需复杂的温度循环,适合快速、高效的DNA扩增。应用场景phi29 DNA Polymerase 广泛应用于多种分子生物学实验:滚环扩增(RCA):用于生成周期性DNA纳米模板,适合检测低丰度核酸。多重置换扩增(MDA):一种等温扩增技术,能够在恒定温度下进行全基因组扩增。全基因组扩增(WGA):用于从微量DNA样本中扩增全基因组,适用于单细胞测序。DNA模板制备:可用于测序的高质量DNA模板制备。 该试剂盒采用一步法RT-qPCR技术,将逆转录和定量PCR反应集成在同一管中完成。50×TBE液体是一种高浓度的核酸电泳缓冲液,广泛应用于DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳实验中。TBE是Tris-Borate-EDTA的缩写,其主要成分包括Tris(氨基三羟甲基甲烷)、硼酸(Boric Acid)和EDTA(乙二胺四乙酸)。这种缓冲液因其高缓冲能力和良好的电泳性能而备受青睐。产品特性高缓冲能力:TBE缓冲液的缓冲能力较强,适合长时间电泳,能够维持稳定的pH值。高分辨率:特别适用于分离小于1 kb的小分子DNA片段,能够提供更高的分辨率。即用型设计:50×TBE液体为浓缩液,使用时只需用去离子水稀释即可,方便快捷。使用方法配制1×TBE工作液:取20 mL的50×TBE液体,加入980 mL去离子水,充分混匀。电泳条件:凝胶浓度:通常使用1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶。电泳电压:建议4-10 V/cm,电泳时间根据片段大小调整。保存条件:室温保存,有效期一般为12个月。注意事项沉淀处理:如果出现沉淀,可置于37℃水浴中使其溶解,不影响使用。缓冲液更换:TBE缓冲液的缓冲能力较强,但长时间电泳可能导致电泳槽过热,建议使用循环装置或及时更换工作液。 Fast T4 DNA连接酶不仅适用于常规的分子克隆操作,还特别适合处理复杂结构的核酸片段。Bst Plus DNA Polymerase 是一种经过基因工程改造的嗜热DNA聚合酶,来源于 Thermophilic Geobacillus sp. DNA Polymerase I,去除了其5′→3′核酸外切酶活性。该酶具有强大的5′→3′ DNA聚合酶活性、链置换活性以及对dUTP的耐受性,非常适合用于防污染的等温扩增反应。产品特性高灵敏度:在LAMP等温扩增反应中,灵敏度低至50 copies/T,反应时间小于15分钟。耐盐性和热稳定性:相比野生型Bst DNA聚合酶,Bst Plus在耐盐性和热稳定性方面表现更优,能够在65℃的等温条件下高效工作。dUTP耐受性:具有较高的dUTP耐受性,适合防污染的等温扩增反应。应用场景Bst Plus DNA Polymerase 广泛应用于以下领域:环介导等温扩增(LAMP):快速、灵敏地检测病原体,适用于现场检测和即时诊断。链置换扩增(SDA):用于高灵敏度的核酸扩增。滚环扩增(RCA):用于DNA的高效率扩增。使用方法储存条件:-20℃保存,避免反复冻融。 上海保藏生物技术中心是一家有着先进的发展理念,先进的管理经验,在发展过程中不断完善自己,要求自己,不断创新,时刻准备着迎接更多挑战的活力公司,在上海市等地区的化工中汇聚了大量的人脉以及客户资源,在业界也收获了很多良好的评价,这些都源自于自身的努力和大家共同进步的结果,这些评价对我们而言是**好的前进动力,也促使我们在以后的道路上保持奋发图强、一往无前的进取创新精神,努力把公司发展战略推向一个新高度,在全体员工共同努力之下,全力拼搏将共同上海保藏生物技供应和您一起携手走向更好的未来,创造更有价值的产品,我们将以更好的状态,更认真的态度,更饱满的精力去创造,去拼搏,去努力,让我们一起更好更快的成长! |