电泳结束后，使用溴化乙锭（EB）或其他DNA染料染色，在紫外灯下观察条带。

在生物实验中，核酸染色是检测DNA和RNA的重要步骤，但传统染料如溴化乙锭（EB）具有致癌性，对实验人员和环境存在潜在危害。4S Green Plus 无毒核酸染料作为一种新型的EB替代品，为科研人员提供了一种安全、高效且环保的选择。4S Green Plus 是一种无毒、非致癌的核酸染料，其灵敏度与EB相当，能够检测到低浓度的核酸分子。它在295 nm和490 nm处具有荧光激发最大值，与结合DNA的EB荧光激发点相近，可在紫外灯或蓝光LED下清晰观察DNA条带。这种染料不仅安全性高，还具有高特异性和荧光稳定性，不会与其他细胞成分结合，且在实验过程中荧光信号稳定。4S Green Plus 的使用方法灵活，既可用于凝胶前染色，也可用于凝胶后染色。在凝胶前染色时，将染料加入冷却至50-60℃的琼脂糖溶液中；在凝胶后染色时，每100 mL染色溶液中加入20-30 μL染料，染色30分钟后脱色即可。此外，4S Green Plus 适合用于琼脂糖凝胶中的双链DNA、单链DNA和RNA的检测。

RcView 吖啶橙核酸染料是一种细胞可渗透的荧光染料，能够与核酸结合并发出强烈的荧光信号。

磁珠法质粒小量抽提试剂盒是一种基于磁性纳米技术的核酸纯化工具，结合了经典的SDS碱裂解法和磁珠吸附技术，能够从大肠杆菌中快速、高效地提取高质量的质粒DNA。工作原理该试剂盒利用磁珠表面修饰的官能团，在高盐条件下特异性吸附质粒DNA，而杂质如蛋白质、盐离子等则通过洗涤液被去除。当条件改变时，质粒DNA从磁珠表面洗脱下来，从而实现快速分离和纯化。产品特点高效提取：从2 mL过夜培养的菌液（OD600 = 2.0）中可获得超过15 μg的高拷贝质粒DNA。操作简便：无需多次离心，整个提取过程可在1小时内完成，适合高通量操作。纯度高：提取的质粒纯度高，OD260/OD280比值一般为1.8-1.9，OD260/OD230比值大于2.0，可直接用于下游实验。自动化兼容：可与自动化核酸提取仪配合使用，实现完全自动化操作。 应用场景提取的质粒DNA可用于多种下游应用，包括酶切、测序、文库筛选、连接和转化等分子生物学实验。使用方法菌液处理：取适量菌液离心，弃上清后用裂解液悬浮细菌沉淀。裂解与吸附：加入裂解液和中和液，裂解细胞后加入磁珠，吸附质粒DNA。

若两个LoxP位点方向相同，Cre重组酶可切除它们之间的DNA片段。

Cre重组酶（Cyclization Recombination Enzyme）是一种位点特异性重组酶，最早于1981年从P1噬菌体中发现。它能够识别并结合特定的DNA序列——LoxP位点，进而引发DNA重组。LoxP位点是一个34bp的DNA序列，包含两个13bp的反向重复序列和一个8bp的间隔区。 工作原理 Cre重组酶通过与LoxP位点的反向重复序列结合形成二聚体，进而形成四聚体复合物。随后，Cre重组酶切割LoxP位点之间的DNA片段，并通过DNA连接酶重新连接切口。重组结果取决于LoxP位点的方向和位置。例如： 若两个LoxP位点方向相同，Cre重组酶可切除它们之间的DNA片段。 若方向相反，则可导致DNA片段翻转。 若LoxP位点位于不同DNA链上，Cre重组酶可介导DNA链交换或染色体易位。 应用 Cre/LoxP系统广泛应用于基因编辑领域，包括基因敲除、基因插入、基因翻转和染色体重排等。它特别适合构建条件性基因敲除小鼠模型，通过组织特异性启动子控制Cre重组酶的表达，从而实现对特定组织或细胞中目标基因的时空特异性敲除。

上样与电泳：混合均匀后，将样品加入琼脂糖凝胶的加样孔中，进行电泳。

在分子生物学实验中，PCR技术的准确性和效率是科研人员关注的重点。Phusion Master Mix (2×) (Without Dye)以其卓越的高保真性和便捷性，成为了高精度基因扩增实验的理想选择。 Phusion Master Mix (2×) (Without Dye)是一种预配制的高浓度PCR反应体系，专为高保真DNA扩增而设计。其核心成分是Phusion DNA聚合酶，这种聚合酶融合了Pfu DNA聚合酶的高保真性和Taq DNA聚合酶的高效合成能力，能够在保证高准确性的前提下快速扩增DNA片段。Phusion酶的保真度比普通Taq酶高出约50倍，甚至比Pfu酶更高，特别适合需要高准确性的实验，如基因克隆、突变分析和长片段扩增。 Phusion Master Mix (2×) (Without Dye)的“2×”浓度设计意味着实验人员只需将模板DNA、引物和水加入其中，即可快速配制好反应体系。这种预混液不仅简化了操作流程，还减少了人为误差，确保了反应体系的均一性和稳定性。此外，无染料配方为后续实验提供了更大的灵活性。

Tris-HCl 提供稳定的缓冲环境，而 EDTA 可以螯合二价金属离子，防止核酸在电泳过程中被降解

2×TBE-Urea 上样缓冲液是一种专为变性核酸电泳设计的试剂，能够有效解除核酸的二级结构，使其保持单链状态，从而实现更清晰的电泳分离效果。组成成分该缓冲液的主要成分包括：尿素（Urea）：用于解除核酸的二级结构，保持其单链构型。 溴酚蓝（Bromophenol Blue） 和 二甲苯青（Xylene Cyanol FF）：作为示踪染料，用于观察电泳的进程。Tris、硼酸和 EDTA：维持电泳过程中的缓冲体系，确保电泳条件的稳定。聚蔗糖（Ficoll）：增加样品密度，帮助样品沉入凝胶孔中。使用方法 样品处理：将 2×TBE-Urea 上样缓冲液与待测核酸样品按 1:1 比例混合，70℃加热 3-5 分钟，使核酸充分变性。上样与电泳：处理后的样品可直接加入变性聚丙烯酰胺凝胶的加样孔中，进行电泳。应用场景2×TBE-Urea 上样缓冲液主要用于单链 DNA（ssDNA）和 RNA 的变性凝胶电泳，广泛应用于基因分型检测（如 SSR 标记、AFLP、RFLP 等）。它不适用于非变性凝胶电泳或蛋白电泳。储存条件该缓冲液应冷冻保存（-20℃），以保证其稳定性和有效性。

缓冲液中的 Tris-HCl 和 EDTA 组分能够维持电泳过程中的稳定环境。

Tn5转座酶是一种能够高效切割并插入DNA的酶，广泛应用于基因组编辑和高通量测序文库构建。它通过识别特定的DNA序列并将其插入到目标DNA中，实现基因组的“跳跃”和重组。 工作原理 Tn5转座酶的工作原理包括以下几个步骤： 复合物形成：两个Tn5转座酶分子结合到供体DNA的转座子的ME序列，形成复合物。 切割与插入：在Mg²⁺存在的情况下，Tn5转座酶切割供体DNA，并将其插入到靶DNA中，形成转座后的DNA序列。 结果：切割形成的9bp粘性末端可通过DNA聚合酶和连接酶填补，最终形成9bp正向重复序列。 应用场景 NGS文库构建：Tn5转座酶能够将DNA片段化并直接连接测序接头，简化了传统的文库构建步骤，显著提高了建库效率。 单细胞测序：通过LIANTI技术，Tn5转座酶可用于单细胞DNA建库，实现微量DNA的高效扩增。 ATAC-seq：用于研究染色质可及性，通过将DNA序列插入开放的染色质区域，检测全基因组范围内的染色质开放程度。 CUT&Tag：结合Protein A/G，Tn5转座酶可用于切割靶蛋白结合的染色质区域，并直接插入测序接头，用于研究蛋白质-DNA相互作用。

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